Experimento de coloração h&e

Universidade do Estado do Rio de Janeiro – UERJ
Departamento de Histologia e Embriologia
Disciplina: Métodos para o estudo da célula
Aluna: Leticia Lima
Graduanda de Bacharelado – Biologia 2013.1

Experimento de coloração e visualização microscópica com corantes hematoxilina e eosina

Introdução: Nesse experimento, células hepáticas foram coradas a fim de observamos suas estruturas celulares: núcleo e citoplasma. Foi utilizada a coloração H&E, hematoxilina-eosina, por meio da qual os ácidos nucléicos presentes no núcleo foram corados pela hematoxilina de roxo, e os elementos básicos da proteína do citoplasma da célula foram corados pela eosina de rosa.

Materiais e métodos:
- Lâmina com amostra de fígado
- Corantes hematoxilina e eosina
- Água destilada
- Álcool 70%, 90% e 100%
- Xilol
- Gaze
- Cola Entellan
- Microscópio de luz O material, após ter passado pelos processos de inclusão e microtomia, estava pronto para ser corado. Primeiramente, a lâmina com parafina foi mergulhada em xilol para dissolver seu excesso. Depois, foi banhada em álcool decrescente (100%, 90% e 70%) para hidratar o material e, em seguida, mergulhada por 3 minutos em hematoxilina, que cora os núcleos de roxo. Lavou-a em água corrente para retirar o excesso e mergulhou-a, também por 3 minutos, em eosina, que cora o citoplasma da amostra de rosa. Em seguida foi banhada em água destilada, para retirar o excesso de corantes e depois desidratada em álcool crescente (70%, 90% e 100%) e banhada novamente em xilol, para clarificar o material, tornando-o mais transparente para ser visualizado. A lâmina foi limpa com uma gaze, e outra lâmina foi colada em cima com cola Entellan para proteger o material, que ficou secando por 24h.

Resultados: Essa técnica distingue o núcleo do citoplasma e apresenta no microscópio óptico duas cores e lacunas, onde antes haviam vasos sanguíneos. A hematoxilina comporta-se como um corante básico, corando estruturas basófilas da célula, e a