Engenharia

Identificação de genes cry de Bacillus thuringiensis

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ÁREAS BÁSICAS

IDENTIFICAÇÃO DE GENES C RY D E B ACILLUS THURINGIENSIS
NO CONTROLE DE S PHENOPHORUS LEVIS , O BICUDO
DA CANA-DE-AÇÚCAR ( 1 )

ELAINE APARECIDA SILVA CÍCERO (2); ANTONIO SERGIO FERRAUDO (3*);
MANOEL VICTOR FRANCO LEMOS (2)

RESUMO
A bactéria B . thuringiensis c aracteriza-se pela produção de proteínas tóxicas a representantes de diversas ordens de insetos, as quais são codificadas por genes c ry. Este trabalho foi realizado com objetivo de selecionar isolados de B . thuringiensis , por meio da caracterização morfológica e molecular, identificando as diferentes subclasses dos genes c ry3 e c ry35 e d eterminar a patogenicidade contra
Sphenophorus levis , uma das mais importantes pragas da cultura da cana-de-açúcar. Foram utilizados
1163 isolados de B . thuringiensis e c om a observação em microscópio com contraste de fases foram confirmadas como pertencentes à espécie de B . thuringiensis. O material genético foi purificado pela matriz de troca iônica “Instagene Matrix” e submetido a PCR com iniciadores gerais c ry3 e c ry35 i dentificandose 30 isolados contendo genes com potencial para o controle de coleópteros, os quais juntamente com as linhagens-padrão de B . thuringiensis v ar. t enebrionis, B. thuringiensis v ar. m orrissone e B . thuringiensis v ar. tolworthi f oram utilizados para a realização do bioensaio. Através de análise discriminante alocaram-se os isolados em quatro grupos quanto à toxicidade de B . thuringiensis. Os grupos ficaram assim definidos: um grupo que promovem até 10% de mortalidade contendo as testemunhas e duas linhagens; u m grupo que causou 39% de mortalidade contendo três linhagens padrão e dez isolados; um grupo com 52% de mortalidade contendo treze isolados e um grupo com 70% de mortalidade contendo cinco isolados, os quais devem ser considerados promissores no controle biológico de S . levis.
Palavras-chave: P CR, bioensaio,