Cromatografia

QUÍMICA I 2009/2010
Trabalho laboratorial 6
Cromatografia em camada fina
Objectivos
Introdução a técnicas separativas cromatográficas, particularmente à de camada fina
(TLC). Identificação de pigmentos presentes nas folhas das plantas.
Introdução
As folhas das plantas contêm pigmentos corados. Os mais importantes são as clorofilas A e B, que lhes conferem a cor verde. Diferem apenas numa pequena parte da sua estrutura, em que um ião Mg2+ se liga a um ligando clorínico. A clorofila A é a mais importante na fotossíntese.
Para além das clorofilas, estão também presentes outros pigmentos, como as xantofilas e os carotenos. O β-caroteno, responsável pela cor laranja das cenouras e de alguns frutos, é um precursor da vitamina A.
As xantofilas são carotenóides oxidados, polares, de cor amarela. Dependendo da frescura das plantas, podem também encontrar-se feofitinas (clorofila em que o ião
Mg2+ foi substituído por 2H+).
As diferentes polaridades destes pigmentos irão ser usadas na sua separação por cromatografia. A cromatografia é um método de separação de misturas de substâncias nos seus componentes. A cromatografia pode ser usada quer como método analítico (no qual se determina o número e natureza dos componentes de uma mistura sem proceder ao seu isolamento), quer como um método preparativo (em que se procede ao isolamento dos componentes de uma mistura).
Existem várias formas de cromatografia (gasosa, em coluna, HPLC, TLC). Em todas elas, a separação dos componentes da mistura é conseguida por passagem da mistura a separar num material insolúvel (a fase estacionária), para o qual as substâncias
(arrastadas numa fase móvel ou eluente) têm vários graus de afinidade. Quanto maior for a afinidade das substâncias para a fase estacionária mais lentamente se deslocam.
Quanto maior for a sua solubilidade no eluente, maior será a sua velocidade. À razão entre o deslocamento de cada componente e da frente do solvente chama-se factor de
retenção,