coloração de gram

Introdução
Sendo microrganismos unicelulares e procariotos de variados tamanhos, as bactérias podem ser classificadas em três grupos morfológicos: cocos, bacilos e espiralados.
Com o objetivo de dividir as bactérias em dois grandes grupos, a técnica de coloração de Gram possibilita a separação de acordo com a estrutura da parede celular, sendo denominadas: Gram-positivas ou Gram-negativas. O método é baseado na capacidade das paredes celulares de bactérias Gram-positivas de reterem o corante cristal violeta no citoplasma durante um tratamento com etanol-acetona enquanto as paredes celulares de bactérias Gram-negativas não o fazem.
A parede celular está presente em praticamente todas as bactérias e possuem características diferentes que podem ser diferenciadas nesse grupo: As Gram-positivas possuem uma parede celular espessa, e é também lisa e homogênea. Já as Gram-negativas possuem uma parede celular de superfície mais complexa e espessura mais fina. A reação de Gram é mais consistente quando usada em bactérias jovens, em crescimento.
Objetivo
Classificar as bactérias;
Diferenciar as bactérias Gram– negativas e Gram positivas;
Aprender a técnica de coloração de Gram.
Materiais
E.coli;
S aureus;
Bico de bunsen;
Salina;
Pipeta de vidro;
Álcool 70%;
Álcool-acetona;
Fuccina.
Óleo de imersão
Pêra;
Alça;
Lamina;
Microscópio;
Lugol;
Cristal Violeta;

Procedimento e métodos
Para preparação das lâminas foi iniciado com a esterilização do local utilizado.
Esfregaço da cultura bacteriana liquida.
Flambamos a alça, deixando esfria-la e mantendo sempre próximo da chama;
Foi retirada uma amostra da cultura (S.aureus) com a alça e deposita no centro da lamina;
Espalhando o material com a alça em movimento circular.
Depois de feito o procedimento, fixamos o esfregaço passando a lâmina sobre a chama do bico de bunsen, repetindo o procedimento três vezes, para que o material fique bem aderido.
Esfregaço da cultura bacteriana sólida.
Flambamos