Bioquimica

DISCIPLINA: Biofísica de Proteína Código: BFS-329
Curso: Bacharelado em Biofísica

PROVAS LABORATORIAIS PARA AMINOÁCIDOS, PROTEÍNAS E CARBOIDRATOS.

O objetivo desta aula prática é familiarizar os alunos com as proprieda- des ácido-base dos aminoácidos e principais reações coloridas de identificação de aminoácidos, proteínas e carboidratos. Faremos 2 exercícios práticos:

1 - Dadas três soluções desconhecidas, rotuladas A, B e C, realizar as reações descritas na Tabela I. Com base nos resultados obtidos, identificar as soluções: solução ( ) - caseína a 2 % solução ( ) - glicina a 0,5 % solução ( ) - glicose a 2 %

2 - Dadas três soluções de aminoácidos desconhecidos, rotuladas X, Y, e Z, construir (em papel millimetrado) as curvas de titulação das três soluções entre os pH's 2 a 12. Com base nos resultados obtidos, identificar as soluções:

solução ( ) - glicina a 0,025 M (pK COOH = 2,34; pK NH2 = 9.6)

solução ( ) - ácido glutâmico a 0,025 M (pK COOH = 2,19; pK NH2 = 9.67; pK R = 4.25) solução ( ) - arginina a 0,025 M (pK COOH = 2,2; pK NH2 = 9,0; pK R = 12,5) Cada aluno deverá entregar um RELATÓRIO DA PRÁTICA, apresentando os resultados dos dois exercícios práticos e JUSTIFICANDO como estes resultados comprovam a identificação das soluções estudadas. Exercício 1. Identificação laboratorial de aminoácidos, proteínas e carboidratos

REAGENTES Ácido Tricloroacético (TCA) 5%
Até 6 gotas Sulfato de Amônio saturado
Até 10 gotas Reagente de Bradford
1 ml Reagente de Ninhidrina 0,1%
10 gotas, ferver 2 min. Reagente de Benedict
2,0 ml, ferver 5 min
TUBO

Sol A

Obs:

A1

1,0 ml A2

0,5 ml A3

1,0 ml A4

0,5 ml A5

4 gotas
TUBO

Sol B

Obs:

B1

1,0 ml B2

0,5 ml B3

1,0 ml B4

0,5 ml B5

4 gotas
TUBO

Sol C

Obs:

C1

1,0 ml C2

0,5 ml C3

1,0 ml C4

0,5 ml C5

4 gotas
TUBO

Água