Biomedicina básica

FACULDADE PADRÃO

DISCIPLINA: HEMATOLOGIA BÁSICA
PROFª TELMA SOUSA PIRES
AULA PRÁTICA Nº 3
ASSUNTO: contagem global de leucócitos em câmara de Neubauer.

CONTAGEM GLOBAL DE LEUCÓCITOS

O sangue é diluído na proporção de 1:20 com líquido diluidor (Líquido de Turk) que hemolisa hemácias e cora o núcleo dos leucócitos pelo azul de metileno.

SOLUÇÃO DILUIDORA

É uma solução hipotônica aquosa de ácido acético que destrói as hemácias.

Ácido acético glacial .............................................2,0 ml Azul de metileno.....................................................1,0 ml Água destilada q.s.p.............................................100,0 ml

Filtrar anteriormente ao uso.

PROCEDIMENTO

1- Pipetar 0,4 ml do liquido diluidor em um tubo. 2- Pipetar 0,02 ml ( 20 μl) de sangue. Limpar sua parede externa com filtro de papel. 3- Transferir os 0,02 ml de sangue para o frasco diluidor, lavando com ele o interior da pipeta por aspiração e expulsão de líquido. A diluição é de 1:20. 4- Agitar suavemente por um minuto, no mínimo. 5- Com uma pipeta encher os dois retículos da câmara de contagem, evitando excesso de líquido e bolhas de ar sob a lamínula, aderida firmemente à câmara por compressão daquela sobre esta, cobrindo ambos os retículos. 6- Deixar repousar por “dois” minutos para sedimentação dos glóbulos. 7- Focalizar a preparação em pequeno aumento no microscópio para localizar o retículo e observar a distribuição uniforme dos leucócitos. Em seguida, observar com aumento de 100x e 400x conforme a necessidade. 8- Fazer a contagem de todos os leucócitos encontrados nos quatro quadrantes da câmara de Neubauer, ou seja, 4 mm².

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Cálculos:

Leucócitos por μl de sangue = Lc x 20 x 10 4

Lc = número de leucócitos contados em 4 mm².
10 = fator de conversão para μl.
20 = fator de