Açucares

Os açúcares redutores e totais foram determinados pelo método colorimétrico de Somogyi-Nelson com modificações (NELSON, 1944; SOMOGYI, 1951). A hidrólise dos açucares não redutores seguiram protocolo de Reganold et al. (2010).
Para análise de açúcares redutores, a amostra foi diluída em água e centrifugada, utilizando o sobrenadante na análise (como minha amostra era bastante triturada, homogênea e os açucares solúveis em água julgamos não ser necessária extração. Se quiser extrair, pode usar metanol seguindo artigo Reganold).
Para hidrólise foi adicionado HCl 0,1M à polpa/suco de fruta diluído em água (como utilzado na proporção 1:1 e deixando reagir em banho-maria em ebulição por 40 min. A hidrólise proposta no Adolfo Lutz para Lane Eynon é de HCl 6,0 M e tem etapa de neutralização com NaOH, o que aumenta muito a variação nas análises.
Em um tubo de ensaio de vidro com tampa, 0,5 mL do sobrenadante foi adicionado de 1 mL do reativo cúprico de Somogyi e colocado em banho-maria em ebulição por 20 min. Após o resfriamento, 0,5 mL do reativo arsenomolibdato de Nelson será adicionado e o volume completado para 10 ou 20 ml dependendo da densidade da cor, pra leitura cair na curva... outras diluições tb funcionam, só corrigir os cálculos. As leituras foram feitas em espectrofotômetro (UV-1601 PC Shimadzu) a 520 nm.
As curvas de calibração para açúcares redutores foram feitas com glicose e para açúcares totais com sacarose submetida à hidrólise para açúcares totais, nas concentrações de 30 a 180 ppm.
Modificações em relação ao original...10 min passei pra 20 min de reação, proporção anterior 1:1:1 e minha 1:2:1 (amostra: Somogyi: Nelson).