Aula 1 Tecnicas E Formas Celulares 2
HISTOLOGIA
Introdução e técnicas
Lenir Orlandi Pereira Silva
Preparação da amostra
1. Fixação
2. Processamento (desidratação, diafanização ou clarificação e emblocamento em parafina)
3. Microtomia
4. Colocação em lâminas
5. Coloração
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Perfusão
Fixação
1. prevenção de autólise e ataque bacteriano
2. preservar a estrutura e composição das moléculas dos tecidos
3. permite uma coloração adequada
Aldeídos: paraformaldeído, glutaraldeído
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Ligações cruzadas
Processamento desidratação, diafanização ou clarificação e emblocamento em parafina, ou congelamento
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Microtomia
Montagem dos cortes Secagem dos cortes 4
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Coloração
Hematoxilina e Eosina
Corante ácido
Eosina, floxina
A parte pigmentada do corante é acida
O radical ácido é carregado positivamente, portanto tem afinidade por estruturas carregadas negativamente, as básicas
Componente acidófilo: parte da célula que tem afinidade pelo corante ácido
O que é corado (róseo)?
Citoplasma
fibras colágenas
a maioria dos filamentos protéicos do citoesqueleto
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Corante básico
Hematoxilina, azul de metileno, azul de toluidina
A parte pigmentada do corante é básica
O radical básico é carregado negativamente, portanto tem afinidade por estruturas carregadas positivamente, as ácidas Componente basófilo: parte da célula que tem afinidade pelo corante básico
O que é corado (roxo)?
o núcleo e o Retículo Endoplasmático Rugoso as proteínas ácidas do citoplasma e algumas substâncias extracelulares como os proteoglicanos que contêm na sua estrutura glicosaminoglicanos ácidos e/ou sulfatados
Hematoxilina e eosina (HE)
Hematoxilina
Eosina
roxo
rosa
Corante
Cora
catiônico ou estruturas básico ácidas
(basófilas)
(+)
Núcleo
Corante
Cora
aniônico ou estruturas ácido básicas
Citoplasma
(-)
(grupos fosfatos dos ácidos nucléicos)
(radicais amino das proteínas) (acidófilas ou eosinófilas) 6
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Língua
Técnica de Nissl
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