ARTIGO

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Sistema em fluxo para determinação espectrofotométrica de uréia em plasma de sangue animal empregando leguminosa como fonte natural da enzima urease

Gilmara C. Luca
Instituto de Química de São Carlos, Universidade de São Paulo
Boaventura F. Reis
Centro de Energia Nuclear na Agricultura, Universidade de São Paulo, Av. Centenário, 303, CP 96, 13400-970 Piracicaba - SP
Recebido em 21/3/00; aceito em 6/7/00

INTRODUÇÃO
A determinação de uréia em fluidos biológicos é um importante parâmetro para diagnósticos clínicos do funcionamento renal, além de ser um dos indicativos da condição nutricional dos animais1. Em vista disso, métodos empregando variadas técnicas de detecção2-7, têm sido propostos no intuito de simplificar e aumentar a sensibilidade na determinação desse analito. Na grande maioria destes métodos4-7, sejam eles espectrofotométricos, potenciométricos, condutométricos ou amperométricos, a enzima urease tem sido empregada, na forma de solução, ou imobilizada em pequenos reatores. Nesses casos, a uréia é hidrolisada produzindo amônio, que é então monitorado direta ou indiretamente, dependendo da técnica de detecção empregada.
O emprego de reações enzimáticas em química analítica tem sido amplamente explorado, principalmente devido à sensibilidade e alta seletividade de tais reações8. Os procedimentos analíticos empregam soluções de enzima purificada ou a mesma imobilizada em suportes apropriados, como esferas de vidro com porosidade controlada, celulose, fibras de nylon entre outros9. A escolha do suporte depende da enzima envolvida, bem como da forma com que esta será imobilizada. Em geral, enzimas imobilizadas apresentam uma maior estabilidade, maior eficiência e menor custo, quando comparadas ao emprego de enzimas em solução, e por esta razão, tem crescido o número de trabalhos empregando enzimas imobilizadas ou sugerindo metodologias para imobilização das mesmas7.
Uma outra maneira de se utilizar enzimas é empregando fontes naturais das