apostilacurso_molecular

TÉCNICAS BÁSICAS
DE BIOLOGIA MOLECULAR

Sandra Regina Ceccato Antonini
Silvana Perissatto Meneghin
Alfredo Seiiti Urashima

1

COORDENADORES
•

Profª Sandra Regina Ceccato Antonini – Doutora no Depto.Tecnologia

Agroindustrial e Sócio-economia Rural, CCA/UFSCar, com pós-doutorado em genética molecular de leveduras na Universidade de Sheffield, Inglaterra.
•

Profª

Silvana

Perissatto

Meneghin

–

Assistente

no

Depto.

Biotecnologia Vegetal, CCA/UFSCar, doutoranda em Microbiologia.
•

Prof. Alfredo Seiiti Urashima -

Doutor no Depto. Biotecnologia

Vegetal, CCA/UFSCar, com pós-doutorado em fitopatologia e biologia molecular na Universidade de Kobe, Japão.

Esta apostila se refere ao curso de extensão universitária “Técnicas básicas de biologia molecular”, oferecido no período de 12 a 16 de julho de
2004, no Laboratório de Microbiologia Agrícola e Molecular (LAMAM), Depto.
Biotecnologia Vegetal / Depto. Tecnologia Agroindustrial e Sócio-Economia
Rural, Centro de Ciências Agrárias, Universidade Federal de São Carlos.

Endereço:

LAMAM - UFSCar
Via Anhanguera, km 174 – Fone : (19) 3543-2612 / 3543-2614
13600-970 – Araras - SP e-mail: [e-mail]

Julho/2004

2

INDICE

1. Introdução…………………………………………………………………

03

2. Segurança no laboratório e disposição de resíduos perigosos……

03

3. Introdução à biologia molecular e marcadores moleculares………..

05

4. Extração de DNA genômico total…………………………...………….. 24
5. Quantificação de DNA…………………………………………………...

26

6. Reação PCR……………………………………………………………...

29

7. Polimorfismo por RAPD…………………………………………………

33

8. Polimorfismo por RFLP…………………………………………………

37

9. Análise dos resultados…………………………………………………

45

10. Bibliografia……………………………………………………………….

48

11. Preparo de soluções……………………………………………………

49

3

1. INTRODUÇÃO

Há várias técnicas em biologia molecular usadas numa ampla variedade de estudos tais como genética de populações, estudos sobre evolução ou filogenia, mapeamento e expressão gênica. Fica difícil cobrir