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Prof. Felipe Crescêncio
• DNA-Replicação semiconservativa
– Cada fita funciona como molde
– Cada molécula filha contém uma fita original
Como descobriram?
Replicação do DNA
• Forquilha de replicação
– Local no qual a dupla hélice é desenrolada para produzir a cópia de cada filamento original.
Replicação do DNA
• Polimerização
– Molde 3’5’
– Filha 5’3’
– Fita contínua;
– Fita atrasada.
Forquilha de replicação Cadeia atrasada Fita de
DNA
sintetiz ada recente
Cadeia
contínua
Replicação do DNA
• Replicação
– Bidirecional
– Bolha de replicação
• Polimerases de DNA
– DNA desenrola na frente da pol III
– Pol III atua seguindo a forquilha
• Polimerases de DNA
– A polimerase de DNA pode ampliar mas não pode iniciar uma cadeia
– Precisa de um PRIMER
• Primer
– Cadeia curta de nucleotídeos que se liga no filamento molde para formar um segmento de ácido nucleico.
– Sintetizado pela RNA polimerase Primase
• Primer
– Fita contínua 01 primer
– Fita descontínua:
• Cada fragmento de okazaki precisa de seu primer
• Poli III amplia o primer com uma cadeia de
DNA
• Poli I remove os primers de RNA e preenche os respectivos espaços com DNA
• DNA ligase
– junta a ponta 3’(DNA preenchedor) com a 5’ (frag.
Okazaki)
• Precisão da replicação
– Fidelidade
– Menos de um erro por 1010 nucleotídeos
– Pol I e Pol III atividade exonuclease 3’ 5’
• Remove pareamentos errados de bases
Revisão
Extensão
• Pol I e Pol III
– Função de revisão
• Excisando bases inseridas erroneamente
– Sem as mesmas haveria mais mutações
– Remoção dos primers pela Pol I ( 5’3’)
• Primase não tem função revisora, logo contém mais erros que o DNA
Revisão
Extensão
Deselicoidização
• Helicase e topoisomerase
– Helicase
• Enzimas que rompem as pontes de H
• Ajusta-se como uma rosca e rapidamente desenrola
Deselicoidização
• Helicase e topoisomerase
– Helicase
• DNA desenrolado é estabilizado por proteínas de ligação unifilamentares (SSB) impede a reestruturação •