Recombinação Sitio Especifica

destas técnicas são provenientes da Microbiologia, Bioquímica, Imunologia e Genética Microbiana e permitiram que a análise do DNA ganhasse um novo enfoque. O DNA tornou-se então, a molécula mais fácil de ser analisada, sendo possível isolar regiões específicas, obtê-las em grande quantidade e determinar a sua seqüência numa velocidade de milhares de nucleotídeos por dia. A Tecnologia do DNA recombinante, como se convencionou denominar este conjunto de técnicas, tem uma ampla aplicação.…

CARACTERÍSTICAS → PROCARIOTO ◙ Transposons → sequências de DNA inseridas em novos sítios genômicos (catalisadas a partir de enzimas específicas - transponsases). → envolvem processos de recombinação e replicação gerando 2 novas cópias do elemento genético transponível original. # uma que permanece no sítio parental. # outra que aparece num determinado sítio alvo. Alteração da integridade de seus sítios-alvo. 1. ativação de genes inativos 2. deleções, inversões e fusões cromossômicas

homólogas em cada extremidade, o gene de interesse mutado e dois genes adicionais para controlo de qualidade do processo. As regiões que se encontram em cada extremidade são homólogas com zonas específicas do genoma que rodeia o gene de interesse. O vector pode-se ligar ao genoma nestes dois pontos por recombinação homóloga. O vector é depois introduzido em células estaminais embrionárias, em cultura, por electroporação (Fig. 1) (3). Estas células derivam de um embrião de ratinho ainda…

híbrida, isto é, a fita velha pareia com a fita nova formando um novo DNA. Para a replicação acontecer é necessário que a dupla fita precursora se abra formando duas cadeias independentes (esse processo ocorre com ação conjunta de uma proteína DNA específica e várias enzimas.) A fita filha é sintetizada pela ação catalizadora da DNA polimerase III, enzima que utiliza como molde a cadeia precursora e incorpora os nucleotídeos de forma sequencial na nova cadeia, produzindo-a de…

número de resistentes, pois quanto mais cedo ocorre a mutação, maior será a o número de mutantes na cultura… 2 5/5/14 Teste de Flutuação Luria & Delbruck, 1943 ORF??? 3 5/5/14 Mutação direcionada • Não confundir com sítio-direcionada!!! • Maior incidência de revertantes lac+ quando lactose é adicionada • Altamente controverso: células metabolicamente ativas são mais susceptíveis a mutações Tipos de mutações • Mutações pontuais • …

..................................................................................... 41 Recombinação entre Sequências Homólogas de DNA ............................................. 42 Moléculas de DNA Recombinam-se por meio de Quebras e Rejunções .................. 42 Modelos de Recombinação Homóloga ...................................................................... 42 Enzimas Envolvidas na Recombinação Homóloga .................................................... 43 Rearranjos do DNA .....

seu DNA cortado em sítios específicos, causando assim a restrição de seu ciclo de replicação que levaria à lise ou destruição da bactéria. Como funcionam as enzimas de restrição? As enzimas de restrição são proteínas que têm a capacidade de reconhecer, na dupla hélice do DNA, sítios de clivagem, ou seja, sequências específicas de 4 ou 6 bases. Uma vez reconhecido, é realizado um corte específico em cada ponto ou sítio em que as moléculas da enzima se ligam. Esses sítios, além de…

DISCIPLINA IMUNOBIOLOGIA Tópico V Prof. Cristiano Machado Gonti jo Depto. Bioquímica e Imunologia, ICB/ UFMG Tópico V. Geração de Diversidade Imunológica Linfócitos B: geração de Imunoglobulinas Importância de RAGs e TdT na recombinação gênica e geração de diversidade Produção de diferentes isotipos (class switch) Imunoglobulinas de membrana (BCR) e livres (Anticorpos) Hipermutação somática Conversão gênica Linfócitos T: geração dos dímeros e Mecanismos de Seleção

outro exemplo da importância da compreensão genética. Novas doenças não surgem espontaneamente, elas são o resultado de alterações genéticas em organismos existente. 1. Genética Bacteriana Os fenômenos genéticos básicos (mutação, replicação e recombinação) são muito semelhantes para todas as formas de vida. O organismo protótipo utilizado em todos os estudos da genética microbiana é a bactéria Escherichia coli. Um aspecto da genética bacteriana de grande importância clínica é a…

pode ser observada entre e dentro das espécies. Devido ao fato de um único tipo de molécula, o DNA, ser o material genético de todos os organismos celulares, das bactérias aos seres humanos, os fenômenos genéticos básicos- mutação, replicação e recombinação- são muito semelhantes para todas as formas de vida. O organismo protótipo, utilizado em todos os estudos de genética microbiana durante os últimos 50 anos, é a bactéria entérica gram-negativa Escherichia coli. Um aspecto da…