mutações
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Aula 3Mutações: tipos, mecanismos e métodos de isolamento e identificação de mutantes
Mutações e Variações
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Importância central para a genética e biologia molecular •
Genótipo e Fenótipo
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Heterogeneidade populacional
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Importância para Evolução
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Darwin x Lamarck
O que é uma mutação?
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Mutações
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Fenótipo x Genótipo: triptofano
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trpA, trpA, Trp-
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Ampr
•
His-
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Lac-
Isolamento e identificação de mutantes •
Resistência a Antibióticos
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Auxotróficos
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Substrato-
•
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Teste de
Flutuação
Luria & Delbruck, 1943
Mutações acontecem mesmo na ausência de fator seletivo, não sendo, portanto, uma resposta à pressão seletiva
Resposta definitiva à teoria de
Lamarck
•
Número de resistentes analisado após sub-divisão das culturas ou uma mesma cultura analisada várias vezes
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Resultado: Quando testadas após o cultivo, havia maior variação no número de resistentes, pois quanto mais cedo ocorre a mutação, maior será a o número de mutantes na cultura… 2
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Teste de
Flutuação
Luria & Delbruck, 1943
ORF???
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Mutação direcionada
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Não confundir com sítio-direcionada!!!
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Maior incidência de revertantes lac+ quando lactose é adicionada
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Altamente controverso: células metabolicamente ativas são mais susceptíveis a mutações
Tipos de mutações
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Mutações pontuais
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Alteração de uma única base
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Pode ou não alterar o fenótipo
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Regiões não codificadoras
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Mutações sinônimas
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Mutações sem-sentido
(amber-UAG, ochre-UAA, opal-UGA)
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Frameshift: Polaridade, Supressão
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Mutantes condicionais
Mutações em larga escala
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Deleções
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Sequências de Inserção
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Transposons
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Sequências invertíveis
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Plasmídeos
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Bacteriófagos
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Restauração do Fenótipo
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