Real Time Pcr

............................... 38 Extração de RNA de Amostras de Tumores............................................. 38 Avaliação da concentração e da qualidade do RNA................................ 39 Síntese de cDNA e PCR em tempo real................................................... 39 Análises estatísticas................................................................................. 42 IV- RESULTADOS ......................................................

casos de ICS por Candida em um hospital terciário de ensino do Mato Grosso do Sul, Brasil, para estudar os aspectos clínicos e epidemiológicos da doença, assim como para determinar a similaridade genética das leveduras isoladas por meio da técnica de PCR-RAPD. Noventa e seis casos de ICS por Candida spp, registrados entre janeiro de 1998 e dezembro de 2006, foram incluídos no estudo. A idade dos pacientes variou de 3 dias a 85 anos, sendo 53 (55,2%) adultos e 43 (44,8%) pediátricos. Eles…

relação entre isolados e suas propriedades de virulência (WEIG & BROWN, 2007). O PCR (Polymerase chain reaction) foi uma das primeiras técnicas descritas para tais aplicações, sendo muito eficiente na distinção de espécies de Candida. Outras técnicas, porém, surgiram com objetivo de potencializar a eficiência do PCR na identificação de microrganismos, como RAPD (Random amplified polymorphic DNA), AP-PCR (arbitrarily primed PCR), RFLP (Restriction Fragment length polymorphism), entre…

susceptible to SIV infection. Madin– Darby canine kidney (MDCK) is the preferred cell line, but primary swine kidney, swine testicle, swine lung, or swine tracheal cells can be used. Wash confluent cell monolayers (48–72 hours post-seeding) three times with cell culture medium containing a final concentration of 1 µg/ml of TPCK1-treated trypsin; however, the concentration will depend on the type of trypsin and the cells used (0.3–10 µg/ml may be used). The cell culture medium can be supplemented

Esse alto desempenho é a grande vantagem dos microarranjos de DNA, quando comparados a metodologias tradicionais como transcrição reversa - reação em cadeia da polimerase(RT-PCR) , PCR em tempo real; northern blots e differential displays que permitem, geralmente, a análise de um transcrito por vez, por meio de amplificação por PCR ou hibridização, ou, ainda, por meio de sequenciamentos de DNA complementar (cDNA). O conhecimento da sequência do genoma humano foi fundamental para que se…

utiliza o ferro da hemoglobina como catalisador para a reação de liberação de luz. Na PCR em tempo real, teoricamente existe uma relação quantitativa entre a quantidade inicial de amostra inicial e a quantidade de produto da PCR, em qualquer ciclo. Real-Time PCR detecta o acúmulo de amplicon durante a reação e os dados são computados após o término da fase exponencial de amplificação. (C) A PCR é empregada somente para regiões conhecidas do DNA devido à necessidade de…

1 Reduzir o risco de CHIKV 6.2 Resposta à introdução CHIKV 47 49 CONCLUSÃO 50 REFERÊNCIAS 52 APÊNDICES 62 Apêndice A – Protocolo de isolamento viral (para cultura de célula) Apêndice B – Protocolo da reação da polimerase em cadeia em tempo real Apêndice C – Protocolos sorológicos IgM e IgG Apêndice D – Exemplo de um formulário de notificação de casos Apêndice E – Relatório de evento/surto de importância para saúde pública Apêndice F – Procedimentos de controle de vetores Apêndice…

de outros parâmetros. % de resultados negativos em população não doente Sensibilidade: propriedade de medir pequenas concentrações. % resultados positivos em população doente. Desvio Padrão: é a medida de dispersão entre valores obtidos e valores reais Implantação do Controle de Qualidade: Controles: usar 2 controles com diferentes concentrações; Controle interno de qualidade: monitoração diária da precisão e exatidão do método analítico; Controle externo qualidade: importante para…

microbiota típica dos canais radiculares infectados. Como por exemplo, a decteção de espiroquetas (Roças et al., 2003), Tanerella forsythia e Treponema denticola (Vianna et al., 2005) nos 20 canais radiculares. Bogen & Slots (1999) usaram o método PCR para detectar a presença de Porphyromonas endodontalis, Porphyromonas gingivalis, Prevotella intermedia e Prevotella nigrescens em 20 lesões periapicais de dentes fechados, associados a infecções endodônticas persistentes…

Recurrência/Metástases (Tg >2 ng/dL e/ou imagem) Imunoistoquímica C+ C+ CP CP Quantificação da IHQ: COLORAÇÃO: INTENSIDADE: 0 - Negativo 0 - Negativo 1 - 1-25 % 1 - Fraco 2 - 25-50 % 2 - Moderado 3 - 50-75 % 3 - Intenso 4 - 75-100 % Real- Time RT-PCR Carcinomas Tecido Normal Expressão de RNAm do gene NIS Expressão de RNAm do gene NIS MUTAÇÕES DE BRAF & EVOLUÇÃO DO CP 219 CASOS Seguimento Mediana= 15 m X 2=4.0 p=0.04 Xing et al, J Clin Endocrinol Metab Dec…