Plasmideos

CLONAGEM VETORES DE CLONAGEM • Veículos de clonagem que conduz o gene de interesse para amplificar as informações genéticas. Alguns tipos de vetores: 1- Plasmídeo: Moléculas de DNA, contendo os elementos necessários para sua replicação e pelo menos um gene que confere resistência a antibiótico. VETORES DE CLONAGEM Para ser um bom vetor, o plasmídeo deve conter: - Origem de replicação - Dois ou mais sítios únicos de clivagem - Gene que codifica um produto que distingue a célula…

Engenharia genética. Iara Barros e Aline Maria Capítulo 5 – Introdução de DNA em células vivas 1) Para que serve a clonagem gênica? Clonagem gênica (técnica do DNA recombinante) consiste na inserção de um segmento selecionado de DNA em um plasmídeo ou no cromossomo de um bacteriófago, que atuam como vetores de clonagem e posterior replicação desses DNA recombinante em um hospedeiro apropriado, como uma bactéria ou uma célula de levedura. A replicação ocorre quando o sistema de…

evoluíram para ocupar hoje todos os hábitats, até aqueles de condições mais extremas. Sua grande capacidade de adaptação está associada à estrutura genômica, que garante a troca de genes entre as bactérias, usando para isso elementos não cromossômicos: plasmídeos, transposons e até bacteriófagos. Estes últimos destroem as bactérias hospedeiras, mas podem carregar e espalhar genes bacterianos. A causa primária é a mutação espontânea e a recombinação dos genes (reprodução), que criam…

por uma mebrana distinta para esse material o que é um plasmideo? Quais os tipos existentes Plasmideos são matérias genético da célula bacteriana disperso no citoplasma composta por zona nuclear, com uma fita dupla do DNA circular Plasmídeos F ou de fertilidade – transportam apenas genes tra e não possuem nenhuma característica além da capacidade de promoverem a transferência conjugativa de plasmídeos; ex. plasmídeo F da E. coli. Plasmídeo R ou de resistência – transportam genes que…

Resultados Os procedimentos realizados visaram a lise das bactérias da espécie Escherichia coli, o que permitiu o isolamento dos materiais desejados, o plasmídeo da célula. Foram separados os matérias desnecessários para o experimento, como algumas proteínas celulares. O material isolado passou por um processo de eletroforese em gel de agarose 0,8%, e o resultado obtido foi visualizado por meio de iluminação com radiação ultravioleta. Assim, foi encontrado o seguinte resultado abaixo:

Cortar o plasmídeo com a enzima de restrição; multiplicar a bactéria para expressão do gene; retirar o gene a ser expresso do cromossomo com a enzima de restrição; inserir o DNA recombinante dentro de uma bactéria; ligar do gene a ser expresso ao plasmídeo com a DNA ligase. Cortar o plasmídeo com a enzima de restrição; inserir o DNA recombinante dentro de uma bactéria; retirar o gene a ser expresso do cromossomo com a enzima de restrição; ligar do gene a ser expresso ao plasmídeo com…

então o DNA binding proteins e endonucleases divide esse DNA em fragmentos CONJUGAÇÃO: Antes de tudo Plasmídeos são compostos de DNA disposto em moléculas circulares que variam em extensão do genoma cromossômico explicando-se de forma autônoma, e comumente, são encontradas várias cópias em uma única célula. Para que ocorra a conjunção Células doadoras devem carrear ao menos um único plasmídeo que contenha um grupo de genes que possibilite a conjugação Após a união de duas células por…

são plasmídeos e quais os tipos de plasmídeos Os plasmídeos são moléculas circulares duplas de DNA capazes de se reproduzir independentemente do DNA cromossómico. Ocorrem geralmente em bactérias e por vezes também em organismos eucarióticos unicelulares e células de eucariotas superiores. Existem dois grupos básicos de plasmídeos: os conjuntivos e os não-conjuntivos. Plasmídeos conjuntivos: contém um gene chamado tra-gene, que pode iniciar a conjugação, isto é, a troca sexual de…

Transferência de plasmídeos entre 2 células – dependente de contato célula - célula 3) TRANSDUÇÃO Mediada por fagos (bacteriófagos) 1. TRANSFORMAÇÃO • • • • Experimento de Griffith (1928) Streptococcus pneumoniae (cápsula patogenicidade) Colônia lisa com cápsula Colônia rugosa sem cápsula 2. CONJUGAÇÃO • Processo sexual de transferência de genes de uma bactéria doadora (F+) para uma receptora (F-). plasmídios ou fatores R 2. CONJUGAÇÃO • Transferência do…

DNA + proteínas • • • • • • Constituído por única molécula de DNA fita dupla Geralmente circular Não delimitado por membrana nuclear Seus genes contém todas as informações Genes housekeeping  manutenção (essenciais) Haplóide • Plasmídeos: genes que promovem vantagem seletiva Número de Genes 70000 60000 50000 Número de Genes 50000 45000 40000 30000 30000 19000 20000 13600 10000 4288 6340 517 0 Mycoplama E. coli Levedura…