RELATORIO FSC QMC 10

diminuem a energia de ativação da enzima. A polifenol oxidase (PFO) extraída da batata que utilizamos no laboratório é um exemplo de enzima que catalisa reações seletivas de oxidação, que nada mais é do que promover a remoção do hidrogênio. O catecol um benzenodiol que sofre oxidação na presença de (PFO). Esta oxidação resulta em produtos como água e benzoquinona. A partir da espectrofometria consegue-se determinar o processo reacional, que determina a quantidade de substrato que foi transformado em produto. A quantidade de produto formado é proporcional ao tempo decorrente de reação. 2) Objetivos Acompanhar um processo reacional por espectrofotometria. Determinar os parâmetros cinéticos de reações catalisadas por enzimas. 3) Procedimento Experimental Preparou - se o extrato de batata ralando meia batata, espremendo e recolhendo o líquido num béquer pequeno. Este béquer foi colocado em banho de gelo para retardar a oxidação. O espectrofotômetro foi ligado para determinar o zero de absorbância no comprimento de onda máximo de absorção da quinona ( max l = 458 nm). Foram realizados 4 experimentos, variando a concentração de catecol de 0,5; 0,75; 1,0; 1,5 mL e mantendo constante os demais componentes. Foram colocados 0,5 mL de catecol 0,05 mol L-1 + 2,5 mL de água numa cubeta, adicionou - se uma gota de peróxido de hidrogênio 10 % em volume. A cubeta foi colocada no suporte de amostra do aparelho (espectrofotômetro) e acertou - se o zero da…

EXPERIMENTAL 2.1 MATERIAIS E REAGENTES Meia batata crua; solução aquosa 0,05mol/L de catecol; água deionizada; peróxido de hidrogênio 10%; cubos de gelo; 1 balão volumétrico de 100mL; 4 cubetas de 3mL para espectrofotômetro; 1 béquer de 100mL; 1 pipeta graduada de 1mL; 1 pipeta graduada de 2mL; 1 pipeta graduada de 5mL; cronômetro; termômetro; espectrofotômetro UV-Visível; balança; 1 amassador de batatas; 1 faca para legumes; 1 recipiente para banho de gelo; frascos lavadores com água…

usamos algumas soluções como a solução de catecol 0,1M; uma solução de ácido tricloroacético (TCA) a 10%; tampão de fosfatos 0,01M pH 6,8; feniltioureia; fenol 0,1M; hidroquinona 0,1M; HCl 0,1M; tampão acetato de fosfatos 0,1M pH 7 e tampão tris 0,1M pH 9. Pôde-se concluir que o enzima estudado prefere condições intermédias, pois é nestas que atua em maior extensão, não suportando facilmente variações extremas de temperatura nem de pH. Também foi percetível que a sua especificidade para…

Introdução E + S enzima substrato ka ka' [ES] E + P complexo enzima-substrato produto Velocidade depende da concentração de enzima Equação de Michaelis-Menten Vmax [ S ] d [ P]  V0  dt K M  [S ] constante de Michaelis-Menten Introdução vmax Velocidade da reação (v) vmax vmax/2 Vmáx KM Concentração do substrato [S] Método de Lineweaver Burk 1 1 Km 1   x V0 Vmax Vmax   S Saturação da curva Procedimento…

purificação de 7,12. O peso molecular determinado foi 82 kDa com valores ótimos de pH 6,0 e 7,0 para 4-metil catecol e catecol, respectivamente; sendo estável por 12 e 24 horas à incubação na faixa de pH 4,0-8,0. A temperatura ótima de atividade foi 35°C e 28°C para 4-metil catecol e catecol, respectivamente. Os valores calculados de energia de ativação (Ea) para esses substratos foram 87,29 cal/mol-1 e 180,97 cal/mol-1. As constantes cinéticas Km e Vmax foram 5,52mmol/L e 1428,57…

Objetivo Estudo das reações catalisadas por enzimas, observando no espectrofotômetro as concentrações diferentes de produto formado. Manipulação dos Dados 1. Calcule as concentrações de catecol usadas na experiência, ou seja, a concentração final dentro da cubeta. Use estas concentrações nos cálculos. Concentração da cinética 1: 0,5ml*0,005mol/L=3,0ml*M M= 0,000833mol/L Concentração da cinética 2: 0,75ml*0,005mol/L=3,0ml*M M= 0,00125mol/L Concentração da cinética 3:…

Diferentemente a esses dois tipos de centros, o tipo-III contém dois átomos de cobre. Proteínas com centros do tipo-III atuam ou como enzimas oxidases (catecol oxidase e tirosinase, por exemplo) ou como proteínas de transporte de oxigênio molecular (hemocianina, por exemplo) Catecol A catecol oxidase é uma metaloenzima de cobre do tipo III, que catalisa a oxidação de o-catecóis às correspondentes o-quinonas. Recentemente, sua estrutura cristalina foi determinada por cristalografia de…

presentes no tecido. A presença de traços de substrato não tem consequências, enquanto concentrações de 100 mg/kg podem resultar em sérias alterações. A polifenol oxidase possui substratos específicos dependendo de sua origem. A especificidade pelo substrato depende não apenas do gênero e do cultivar, mas também da localização da enzima dentro da própria fruta ou hortaliça. O pH em que a atividade é determinada afeta na preferência pelo substrato. A seletividade da enzima para…

de cisteína e ácido ascórbico têm sido apontados como efetivos na prevenção do escurecimento de produtos minimamente processados. Assim como na banana, a maçã e a batata possuem a enzima polifenoloxidase, responsável pelo escurecimento de frutos e vegetais depois de cortados e expostos ao ar. A esse processo dá-se o nome de escurecimento enzimático. O mecanismo através do qual essa enzima atua baseia-se na oxidação de compostos difenólicos (que possuem dois radicais hidroxila, -OH,…

Michaelis-Menten. V0 = Vmax [S] [S] + Km Neste experimento o catecol é convertido em quinona, através da reação catalisada pela enzima polifenoloxidase (oxirredutase) que foi extraída de batatas cruas, raladas. Foram realizadas leituras de absorbância em 458 nm, a cada 20 segundos - até atingir 300 segundos (5 minutos) de 5 concentrações de catecol diferentes. 3. Experimento 3.1 Materiais e reagentes…