Polifenoloxidase

Polifenoloxidase

Curso: Química
Licenciatura, 1º Ano, 2º Semestre
Disciplina: Química Biológica
15 de Maio de 2015

Catarina António: 46698
Luís Policarpo: 46691
Miguel Barros: 46696
Índice
Resumo 3
Resultados 4
Discussão 10
Bibliografia 15

Resumo

Este trabalho teve como objetivo observar a ação de uma enzima sobre um substrato, através de vários tipos de fatores. Ao longo da atividade, foram-se realizando alguns procedimentos diferentes. Inicialmente, preparou-se o extrato enzimático a partir da batata, depois utilizou-se o extrato obtido para os diversos testes, tendo estes como objetivo a observação da ação da polifenoloxidase, a natureza química da mesma, a especificidade para o substrato, o efeito da concrentação do enzima, o efeito da temperatura e, por fim, o efeito do pH. Para a realização dos vários testes, utilizou-se como enzima e como extrato uma solução obtida da batata, e para realizar os testes usamos algumas soluções como a solução de catecol 0,1M; uma solução de ácido tricloroacético (TCA) a 10%; tampão de fosfatos 0,01M pH 6,8; feniltioureia; fenol 0,1M; hidroquinona 0,1M; HCl 0,1M; tampão acetato de fosfatos 0,1M pH 7 e tampão tris 0,1M pH 9. Pôde-se concluir que o enzima estudado prefere condições intermédias, pois é nestas que atua em maior extensão, não suportando facilmente variações extremas de temperatura nem de pH. Também foi percetível que a sua especificidade para o substrato não é absoluta e se existirem algumas semelhanças de outros compostos com o seu substrato, o enzima também irá atuar sobre estes, mas com menor influência.

Resultados

Para poder dar início à atividade, foi necessário obter o extrato enzimático. Procedeu-se então à sua preparação, retirando-o de duas batatas cortadas em cubos e adicionando tampão de fosfatos 0,01 M com pH 6,8. Os cubos foram para uma liquidificadora de modo a ter-se um “batido de batata” que, depois de ser filtrado, constitui o extrato enzimático.
Após a adição dos