Técnicas de semeadura em micro
ESGOTAMENTO
A técnica de semeadura por esgotamento é utilizada para obtenção de colônias isoladas em meio sólido. A técnica visa obter colônias isoladas de bactérias presentes em materiais biológicos, permitindo a diferenciação de diferentes bactérias.
Passo a passo.
1- Esterilizar a alça de platina na chama.
2- Mergulhe a alça de platina esterilizada na amostra que lhe é apresentada.
3- Encoste a alça carregada de bactérias na superfície do ágar e inicie movimentos de zigue-zague retilíneos, uniformes e bem próximos.
4- Desencoste levemente a alça de platina da superfície, gire a placa (± 90°), encoste novamente a alça de platina no final da primeira semeadura e inicie nova semeadura com movimentos em zigue-zague, retilíneos, unifomes e um pouco mais espaçados.
5- Desencoste levemente a alça de platina da superfície, gire a placa (± 90°), encoste novamente a alça de platina no final da segunda semeadura e inicie nova semeadura com os mesmos movimentos, mas desta vez, bem espaçados.
6- Incube em estufa para crescimento sob tempo e temperatura sugeridos.
ANTIBIOGRAMA
Técnica destinada à determinação da sensibilidade bacteriana in vitro frente a agentes antimicrobianos, também conhecido por Teste de Sensibilidade a Antimicrobianos (TSA).
1- Retirar as placas e os frascos com os discos da geladeira cerca de 20-30 minutos para que adquiram a temperatura ambiente antes da execução da prova.
1.1- Com uma alça bacteriológica em platina devidamente flambada e resfriada, tocar na colônia recente (18-24h);
2- Suspender as colônias em solução salina estéril (NaCl 0,85%) até se obter uma turvação compatível com o grau 0,5 da escala Mac Farland (1x106 UFC/mL).
3- Para este passo deve ser utilizado um tubo aferido na escala 0,5 de Mac Farland como comparativo (solicite ao seu vendedor) ou um turbidímetro.
4- Sature um swab de algodão com a suspensão bacteriana. Remova o excesso de umidade girando o swab contra a parede