Trabalho Amilase Salivar Jaime

Daniel Marioti Secchieri – RA:166236
Gabriel Candolato de Almeida – RA:167800
Thomas Barbin-RA:177672
Maria Vitória Avolino – RA : 173926

RELATÓRIO AULA PRÁTICA: Enzimas: Atividade da Amilase Salivar
Disciplina: DB011 - Bioquímica

PIRACICABA
2015

1. Introdução A enzima amilase salivar (ou ptialina), produzida pelas glândulas salivares, mais especificamente pela parótida, é uma enzima da saliva que, em pH neutro ou levemente acido, digere o amido transformando-o em maltose.
Nessa atividade prática no laboratório, realizamos experimentos relacionados à amilase salivar, adquirida por meio da coleta de saliva de todos os integrantes do grupos, que posteriormente foi centrifugada pelo técnico de laboratório para uso adequado.

2. Materiais, métodos e resultados:
Saliva centrifugada diluída 5x e 10x;
Amido 1% em NaCl 0,1M;
Iodo (Lugol: I2/I-);
HCl 0,4%;
Tampão pH 5,0;
Tampão pH 7,0;
NaOH 0,4%;
Reativo de Benedict;
Banho maria à 4ºC, 37ºC e 100ºC;
Pipeta automática;
Tubos de ensaio;
Máquina centrifugadora.

No início da aula, o técnico de laboratório deixou as amostras preparadas da seguinte forma: um copo com vários refiz de pipetas, 4 copos para recolhimento das amostras de saliva, e diversos frascos com o reagentes das reações que seriam estudadas, tais como Amido 1%, água destilada, etc.

I- Ensaio Qualitativo da Atividade Enzimática:
Nos tubos contendo iodo e água foi adicionado, a cada dois minutos, amido com amilase salivar, os quais estavam em banho maria a 37ºC (temperatura ótima da enzima). Desta forma, apresentaram variações na coloração, como de azul escuro (t=0), até chegar ao ponto acrômico, ou seja, incolor (t=30min). Os tubos de ensaio foram, ao final do ensaio, separados de 3 em 3, devido à devagar atividade enzimática (tubos 0, 3, 6, 9, 12, 15). À partir do tubo de ensaio número 9, foi possível observar a descoloração de azul para violeta, fato ocorrido por conta da quebra da sua estrutura cíclica. A cor