Teste de Elisa

O teste de ELISA detecta a presença de anticorpos em um soro com o auxilia de uma reação enzimática (teste imunoenzimático). Onde um antígeno que se encontra aderido a placa de ELISA é preparada e em seguida é colocada sobre o soro que deseja testar, em busca de anticorpos contra antígenos. Em caso de haver anticorpos no soro o mesmo se ligara formando uma ligação antígeno-anticorpo, após ser identificado pela adição de um anticorpo dirigido contra imunoglobulina da espécie onde se busca detectar os anticorpos a qual é ligado a peróxidos. Estes anticorpos anti-1gG, ligado á enzima denomina-se conjunto. Ao adicionar o substrato apropriado para a enzima H2O2 dissolvidos em uma substancia química que da uma reação colorida quando H2O2 é desdobrado.
Métodos

1. Inicialmente a Ag é adicionado á placa e se adere á superfície dos poços.
2. Em seguida, são realizadas lavagens para a retirada do Ag livre nos poços.
3. A solução a ser pesquisada é adicionada caso contenha Acs especifica contra os Ags presentes no placa, este se ligara aos Ags.
4. Uma nova série de lavagens é realizada para retirar os Acs que não se ligaram aos Agc.
5. E então adicionado o conjugado, que se liga oa Acs.
6. Uma nova lavagem retira o conjugado livre.
7. O cromógeno e o substrato são adicionados, e se o cromogênio for oxidado pela ação da reação enzimática, haverá desenvolvimento de cor. A interpretação dos resultados A intensidade da cor é diretamente proporcional a concentração de Ac da amostra pesquisada. Para determinar quais indivíduos são positivos ou negativos para a doença pesquisada, deve se calcular um ponto de corte para aquele ensaio. Acima dos limites da cut-off encontra-se os indivíduos positivos e abaixo do negativo. Com o teste de ELISA podemos diagnosticar doenças de chagas e vírus de HIV.

http://www.slideshare.net/labimuno/elisa-3454963
http://www.infoescola.com/medicina/teste-elisa/