Tabalhos

ROTEIRO - AULA PRÁTICA IANÁLISE QUANTITATIVA DE FUNGOS E BACTÉRIAS DO SOLO

1.INTRODUÇÃO Apesar de certas limitações, a técnica da diluição em série e plaqueamento é largamente utilizada em Microbiologia para o exame quantitativo e/ou qualitativo de populações microbianas: bactérias, actinomicetos, fungos, etc. de um solo.
2.OBJETIVOS
Quantificar e qualificar populações de fungos e bactérias de amostras de solo pelo método da diluição e plaqueamento.

3.MATERIAIS NECESSÁRIOS
Amostras de solo peneiradas em malha de 2 mm
Erlenmeyers com 90 mL de água destilada e esterilizada ou solução salina0,85% Na Cl, contendo esferas de vidro.
Tubos de ensaio com 9 mL de água destilada e esterilizada ou solução salina0,85% NaCl
Pipetadores automáticos de 1 mL e 0,1 mL
Ponteiras amarelas e azuis esterilizadas
Placas de Petri com meios de cultura para fungos (Agar Sabouraud Dextrose ou Meio Martin)
Placas de Petri com meios de cultura para bactérias (Meio Agar Nutriente)
Alça de Drigalsky
Estantes ( racks) para tubos Canetas para retroprojetor
Câmara de segurança biológica desinfetada
Estufa de cultivo regulada para 28 °C
Mesa agitadora
Agitador de tubos

4.PROCEDIMENTO Preparar as diluições base 10, iniciando com a suspensão de 10g de terra úmida em90 mL de água em erlenmeyer (10). Agitar em mesa agitadora por 15 minutos. Retirar uma alíquota de 1 mL do erlenmeyer e adicionar em 9 mL de água do tubo(10
-2
). Agitar o tubo e retirar uma alíquota de 1 mL e passar para outro tubo (10
-3
) eassim sucessivamente até a diluição 10
-5
. Inocular 0,1 mL de cada tubo para placasde Petri com meios de cultura específicos. Distribuir o inóculo com alça deDrigalsky, anotar a diluição e amostra, e incubar em estufa a 28°C por 7 dias. Fazera contagem das colônias utilizando contador automático, se necessário. Expressar osresultados em UFC (unidades formadoras de colônias) por grama de solo seco.
Para fungos: usar as diluições 10-¹, 10-²
, 10-³ Para bactérias: usar as diluições 10-³
, 10-