Relátorio bioquimica - reações coradas, cromatografia em papel e eletroforese de proteínas e aminoácidos
“Júlio de Mesquita Fillho”
Departamento de Bioquímica e Tecnologia Química
Reações Coradas, Cromatografia em papel e Eletroforese de Proteínas e Aminoácidos
Introdução
Aminoácidos são monômeros das estruturas conhecidas como proteínas. Existem 20 aminoácidos fornecedores, que são divididos em diferentes grupos segundo sua carga em pH 7,0. A estrutura que compõe os aminoácidos é um grupo amina, um grupo carboxila, um hidrogênio e um grupo R (que diferencia cada um dos 20 aminoácidos) ligados à um carbono α. Proteína é uma cadeia polipeptídica formada a partir de resíduos de aminoácidos em ligações peptídicas (formada de uma desidratação proveniente da reação do grupo amina e do grupo carboxila). Há quatro diferentes classificações estruturais para as proteínas: primária, secundária, terciária e quaternária, cada qual com uma característica específica que a define. A fim de identificar os aminoácidos provenientes de amostras analisadas no laboratório, foram utilizadas três técnicas distintas: * Reações Coradas * Cromatografia em papel * Eletroforese As reações coradas são reações que especificam as características únicas de cada um dos aminoácidos e de seus grupos funcionais, sendo ela guiada pelos diferentes grupos químicos encontrados neles. A cromatografia, por sua vez, consiste no método de separação, na qual constituintes da amostra são divididos em duas fases, uma estacionária e outra móvel. Já a eletroforese analisa os diferentes PIs (pontos isoelétricos) dos aminoácidos, em um determinado pH, a partir da migração de íons em um campo elétrico.
Materiais e Métodos Foram utilizadas para a identificação na amostra quatro: Técnicas de reações com ninidrina e biureto, teste para aminoácidos sulfurados, reações de xantoproteína e de Millon, reações por precipitado de ácido fosfotunguístico, reações de Pauly (para a identificação de histidina), reações de Sakaguchi (para a identificação de