Relat Rio HPLC
Determinação de cafeína por Cromatografia Líquida de Alta eficiência em fase reversa.
24/09/2014
Alunos: Amanda Cabral Carlos Alberto Cardoso Fernanda Melo Peterson Almeida
Professor: Julio Page
INTRODUÇÃO
A cromatografia (em grego significa kroma (cor) + graph (escrever)) é um método físico-químico de separação. Ela está fundamentada na migração diferencial dos componentes de uma mistura, que ocorre através da ação de forças químicas, como polaridade e físicas entre a fase móvel, que pode ser um gás ou um líquido, e a fase estacionária, determinando assim a resolução e, portanto, a separação destes componentes individualmente. A cromatografia pode ser utilizada para identificação de compostos, por comparação de padrões pré-existentes, para purificação de compostos, separando-se as substâncias indesejáveis e para separação dos componentes de uma mistura.
Ela tem sua origem em 1903 quando o botânico russo Michael S. Tswett apresentou um trabalho para a sociedade de Ciências de Varsóvia onde ele detalhou seus experimentos envolvendo extratos de folhas que através de uma coluna de vidro recheada de carbonato de cálcio conseguiu separar esses extratos com a passagem de éter di-etílico dentro da coluna. Porém, logo foi percebido que a eficiência da coluna poderia ser aumentada por meio da diminuição do tamanho da partícula. Entretanto, esta tecnologia foi desenvolvida somente no final dos anos 1960 na qual exigiu instrumentos sofisticados operando a altas pressões, que contrastavam acentuadamente com as colunas de vidro simples da cromatografia líquida clássica. O nome cromatografia líquida de alta eficiência foi empregado para distinguir estes novos procedimentos.
Este é um dos métodos de mais importante das técnicas cromatográficas; consiste na utilização de colunas empacotadas por materiais especialmente preparados e uma fase móvel,