Protocolo Bioquimica

FATORES QUE AFETAM A ATIVIDADE DAS ENZIMAS:
INFLUÊNCIA DO pH
PRÁTICA: Determinação do pH ótimo da invertase
OBJETIVOS
1. Reconhecer o pH como um dos fatores que podem influir na atividade enzimática. 2. Identificar a natureza protéica das enzimas como a razão principal para a modificação da atividade enzimática em função do pH.
3. Reconhecer a existência de um pH ótimo para a atividade de uma determinada enzima.
4. Reconhecer que o pH ótimo pode variar, de acordo com a enzima considerada. 5. Identificar a desnaturação e as modificações na ionização dos radicais dos aminoácidos da molécula enzimática como os principais efeitos das alterações do pH do meio onde ocorre a reação enzimática.

PRINCÍPIOS TEÓRICOS
As enzimas são proteínas com atividade catalítica e, portanto, podem sofrer modificações estruturais e iônicas em decorrência da variação do pH do meio em que se encontram.

Atividade Enzimática

Construindo um gráfico com a atividade das enzimas na ordenada e com valores crescentes de pH na abcissa, mantidas as outras condições ideais, vamos encontrar, para a maioria das enzimas, uma curva em forma de sino, conforme a figura abaixo.

2

4

6

8

pH

O valor de pH correspondente à maior atividade é chamado de pH ótimo para a enzima considerada, nas condições em que se realizou o experimento.
Para a maioria das enzimas o pH ótimo situa-se entre 4 e 8, muito embora a atividade da maioria das enzimas caia, abruptamente, à medida que o pH se afasta para o lado ácido ou para o lado alcalino do seu pH ótimo. Algumas enzimas podem apresentar um pH ótimo dentro de um intervalo mais extenso de pH.

Valores extremos de pH podem ocasionar uma desnaturação da molécula enzimática com a conseqüente perda da atividade catalítica, como se pode observar na curva apresentada acima. Uma exceção notável é a da
Pepsina, cujo pH ótimo situa-se em torno de 2.
Variações não tão intensas, acima e abaixo do pH ótimo, afetam a