Procedimento padrao par canulação do Leito mesentérico
PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRÃO DO SISTEMA DO LEITO MESENTÉRICO
Laboratório de Hipertensão Arterial
Antes de iniciar o experimento são necessários os seguintes procedimentos:
1) Preparo da solução de Krebs ( ou solução nutridora):
Estoque
Krebs A Modificado (Vidro 1) para 1L Krebs B Modificado (Vidro 2) para 1L
No dia do experimento:
As seguintes materiais são necessários para o preparo da solução de Krebs:
Balão volumétrico
Proveta
Vidro de relógio
Bastão de vidro
Espátula
Funil
Gaze
Para cada 1L de solução de Krebs:
- Adicione água deionizada (aproximadamente 500 ml) num béquer para diluição de 2 gramas de glicose.
- Em seguida, adicionar numa proveta, 50ml de solução de krebs 1.
- Adicionar mais água deionizada (aproximadamente 200ml)
- Adicionar 50ml de solução Krebs 2.
-Transferir esse conteúdo para um balão volumétrico, porém no momento da transferência essa solução deverá ser filtrada com um auxílio de um funil contendo gaze ou algodão.
- Completar o volume com água deionizada até a marcação.
- Colocar o erlemeyer 250ml, contendo a solução já filtrada, no banho e aerá-lo com mistura carbogênica. OBS: Afrouxar a válvula do cilindro e apertar a válvula de regulagem até obter uma aeração ótima. A válvula tem sentido inverso de abertura.
Procedimentos básicos no dia do experimento:
- Preencher o banho-maria com água com o nível acima do mínimo especificado pelo fabricante.
- Verificar a calibração do aparelho de biopac;
- Verificar se o sistema (conexões / mangueiras) está limpo!
- Conectar o sistema à bomba de perfusão.
- Ligar o banho para que a temperatura comece a se ajustar (37° C).
- Verificar se há bolhas no sistema. Caso haja bolhas, retirá-las.
- Verificar o fluxo. O