Preparação de Lâminas Vegetais

Preparo de Lâminas permanentes de material vegetal
Fixação
Fixador= formol : ácool70% : ácido acético glacial (1:1:1) ex: 50 ml formol 50 ml álcool 70% 50 ml HOA
Mínimo de 48 horas
Lavar em álcool 50 ou 70% (áccol 70 pode durar anos, desde que troque a solução que vai evaporando)Desidratação
Ácool 70 % 1h
Ácool 80 % 1h
Ácool 90 % 1h
Ácool 100 % 1h
Ácool 100 % 1h
Ácool 100 % 1h
Diafanizar
Álcool 100% - xilol (2:1) – 1h
Álcool 100% - xilol (1:2) – 1h
Xilol ( até diafanizar ) mais ou menos 3 horas
Embebição em parafina
Saturar- raspar parafina do frasco contendo o material com xilol até saturar. Embeber por no mínimo 12 horas (1noite)
Limpar xilol antes placa
Em seguida: 3 banhos de parafina pura a 58-60°C de 1 hora cada um (total =3h)
Microtomia 20 a 25 micra Montagem
Montar em laminascom adesivo Haupt ou colar com albumina de ovo e colocar em estufa por no mínimo 12h (1 noite) a 36°C
*albumina clara de ovo coada,50% glicerina pouco timol deixar de um dia pro outro na geladeira
Folha -> colocar em pé, corte sai na horizontalCaule-> colocar deitado, corte sai na verticalDesparafinizar e hidratar
Xilol – 5 min
Xilol – 5 min
Álcool 100% - 2 min
Álcool 100%- 2 min
Álcool 90%- 2 min 1l
Álcool 80%- 2 min 1l prepara na hora
Álcool 70%- 2min 1l prepara na hora
Álcool 50% - 2 min 1l prepara na hora
Corar
Usar safranina (solução a 4% em álcool 50%) por 3h
Retirar o excesso com álcool 50% se necessário
Desidratar
Álcool 70% - 1 min
Álcool 80% - 1 min
Álcool 90% - 1 min
Álcool 100% - 1 min
Corar
Usar verde rápido (solução estoque – 2,0g de corante em 200 ml de óleo de cravo). Colocar 5 gotas da solução estoque numa mistura de álcool-xilol (3:2) por 1 a 3 min. Banho de xilol por 5 min
Montagem
Montar em bálsamo do Canadá ou semelhante e colocar em estufa a 40°C
Etiquetar
Obs: Fixar e deixar o material na etapa de álcool 70%, pode durar até mais de um ano, desde que troque a solução de álcool
O tamanho do material a ser