PESQUISA

Protocolo 01
Título: Amostragem do Solo
Objetivo: Amostrar o solo para proceder com as análises microbiológicas e físico-químicas.
Metodologia:
a) Em cada uma das áreas serão coletadas 6 amostras compostas, sendo 3 amostras compostas de borda (AB) e 3 amostras compostas de centro (AC). Cada amostra composta será constituída por 6 sub-amostras de 0-20 cm do solo, conforme o desenho amostral abaixo:

b) Armazenar as amostras compostas dentro de sacos plásticos estéreis de 5L devidamente etiquetados.
c) No intervalo de cada amostragem, lavar o trado cilíndrico com água destilada e logo com solução de hipoclorito de sódio, para evitar uma contaminação cruzada.
d) Transportar as amostras para o Laboratório de Microbiologia da UFV – campus Florestal, dentro de caixas de isopor não refrigeradas, mantendo a temperatura homogênea ao longo do trajeto.
e) Antes das análises, verter as amostras em vasilhas estéreis para homogeneizar as sub-amostras. No Laboratório de Microbiologia, serão realizados os protocolos 02 / 03 / 04 / 05 / 06 / 07 / 08.
Protocolo 02
Título: Diluição Seriada
Objetivo: Diluir as amostras de solo para serem melhor analisadas.
Metodologia:
a) Pesar 25g de cada amostra de solo e homogeneizar cada uma delas com 225ml de água peptonada estéril (10-1 ou 1:10).
b) Retirar uma alíquota de 0,1ml do homogeneizado 10-1 e homogeneizar com 0,9ml de água peptonada dentro de eppendorfs estéreis (10-2).
c) Continuar fazendo a diluição seriada das amostras até 10-5.
Protocolo 03
Título: Análise Microbiológica
Objetivo: Determinar a riqueza de fungos cultiváveis de amostras de solo coletadas em vários cultivos.
Metodologia:
Isolamento de Fungos (F)
a) Plaquear 100µl das amostras de solo 10-5 em meio Ágar Dextrose Batata (BDA), com três repetições para cada amostra.
b) Incubar a 25ºC ± 2°C por até 7 dias.
c) Contar as unidades formadoras de colônia (UFC) separando-as por morfotipos distintos.
Protocolo 04
Título: Análise de pH
Objetivo: