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DETERMINAÇÃO DO ÁCIDO HIPÚRICO URINÁRIO POR CROMATOGRAFIA GASOSA

Alunos:

Período/Turno: 7º Manhã

PREPARO DA AMOSTRA

-Transferir respectivamente 0,5 mL da amostra, 0,5 mL de pool de urina (branco) e 0,5 mL de um padrão de Ácido Hipúrico em urina (1; 2; 3 ou 4 g/L) para tubos de vidro rotulados de Amostra, Branco e Padrão.

-Submeter todos os tubos à seguinte seqüência analítica:

-Adicionar 5 gotas de HCl 6 mol/L e 4 mL de acetato de etila e fechar com as tampas

-Agitar os tubos e transferir cerca de 3,0 mL da fase orgânica superior para outros tubos de ensaio rotulados com a ajuda de uma pipeta de vidro de 5 mL

-Adicionar 01 ponta de espátula com sulfato de sódio anidro em cada tubo, agitar manualmente e transferir 1,0 mL da fase orgânica para outros tubos rotulados Amostra, Branco e Padrão.

-Reconstituir os extratos com 300(L de agente derivatizante

-Agitar os tubos por 10 segundos em agitador mecânico e injetar 1 (L no CG.

QUANTIFICAÇÃO DO ÁCIDO HIPÚRICO (AH)

Construir a curva de calibração utilizando as áreas dos picos de AH dos padrões em função de suas concentrações, subtraindo a área do padrão de AH da área do branco em todos os pontos da curva, exceto da amostra:

R = área do pico do padrão AH – área do pico do branco

Calcular a concentração da amostra analisada através da reta do gráfico ou pela equação da reta.

Reportar o resultado da amostra corrigida pelo valor de creatinina da amostra

DADOS

Tempo de retenção do AH = 10,40 + 0,2 min

Área do AH no Branco: 30

Creatinina da amostra = 0,5 g/L

VR = 1,5 g/g de creatinina (quadro I, NR-7)

IBMP = 2,5 g/g de creatinina (quadro I, NR-7)

FINALIDADE DO ENSAIO

Determinar a concentração do biomarcador Ácido Hipúrico em uma amostra de urina para avaliar o grau de absorção de tolueno e/ou uma provável