Na Espectrofotometria

2. Introdução
2.1 espectrofotometria
A concentração de substâncias pode ser determinada medindo-se a luz absorvida por uma solução, através do método espectrofotométrico.
Se um raio de luz monocromático atravessar uma solução contendo uma substancia capaz de absorver luz neste comprimento de onda., uma parte desta luz incidente (l0) será absorvida e uma parte será transmitida (l).
Chamamos de transmitância (T) a razão entre a intensidade da luz transmitida (l) e a intensidade da luz incidente (l0).
A transmitância de uma solução depende dos seguintes fatores:
- Natureza da substancia
- Concentração
- Espessura da solução
A relação entre três fatores é descrita quantitativamente pela lei de Beer-Lambert, ou simplesmente lei de Beer , segundo a qual a transmitância de uma solução em um determinado comprimento de onda é: T= 10^-ebc.
Onde(e) é a absortividade molar;
C é a concentração expressa em Mol/L (M);
B é o caminho óptico e é geralmente expresso em cm.
Como a transmitância é uma função exponencial, aplicando-se o logaritmo temos:
Log T = -ebc ou –Log T = ebc
Chamando-se (-log T) de absorbância (A) temos
A = ebc
Portando a lei de Beer estabelece que a absorbância de uma substancia em solução é diretamente proporcional a sua concentração e a espessura que a luz atravessa.
A utilização da lei de Beer requer o estabelecimento do comprimento de onda à absorção máxima. Conhecendo-se este comprimento de onda, preparam-se soluções com concentrações conhecidas e determina-se a absorbância neste comprimento de onda. Fazendo-se um gráfico da absorbância (Eixo Y) em função da concentração (Eixo X), obtém-se uma reta que é chamada de curva padrão, a qual poderá ser utilizada para determinar a concentração de soluções a partir dos valores da absorbância. Como valores de (e) para muitas substancias são conhecidos, ou podem ser facilmente determinados (fazendo-se um espectro de absorção), e também porque a determinação de A é simples, este método é bastante utilizado para