Microbiologia

Instituto de Ciências da Saúde
Curso: Biomedicina
Disciplina: Microbiologia
Titulo da Aula: Coloração de Gram
AULA
1

OBJETIVO: A avaliação da morfologia microbiana é muito importante para a execução da maior parte dos exames microbiológicos. A coloração de Gram também deve ser revisada dada sua grande importância no diagnóstico clínico das amostras microbiológicas.
TÉCNICA COLORAÇÃO DE GRAM
1) Em uma lâmina pingar uma gota de solução salina estéril.
2) Recolher uma colônia pré-cultivada com alça bacteriológica.
3) Colocar a colônia selecionada junto à lâmina e homogenizar.
4) Fixar o esfregaço no calor.
5) Cobrir o esfregaço com cristal de violeta por 1 minuto.
6) Lavar o esfregaço com água corrente removendo o excesso de corante.
7) Cobrir o esfregaço com lugol por 1 minuto
8) Repetir passo 6.
9) Descorar com álcool acetona até remover o excesso de corrante.
10) Repetir passo 6
11) Cobrir o esfregaço com safranina por 30 segundos.
12) Lavar e secar
13) Examinar ao microscópio (1000x)

MATERIAIS
QUANTIDADE
Solução salina
10 mL (por grupo)
Corantes para a coloração de Gram
01 por grupo
Cristal de Violeta, Lugol, Álcool-Acetona e Safranina
01 por grupo
Placas pré cultivadas com S. aureus
01 por grupo
Placas pré cultivadas com E. coli
01 por grupo
Óleo de imersão
01 por grupo
EQUIPAMENTOS
QUANTIDADE

Lâminas
05 por grupo

Microscópios
01 por grupo

Alças bacteriológicas
01 por grupo

Estufa 37°C
01

Atenção todas as práticas da presente disciplina devem ser executadas seguindo as boas práticas em microbiologia no que diz respeito à manipulação e descarte de microrganismos.
Descarte do material utilizado conforme Normas Internacionais de Segurança