Microbiologia

Coloração de Gram
FINALIDADE:
Sistema para coloração de bactérias em esfregaços de material colhido em áreas diversas. Usado também como método de identificação de colônias isolados em meios de cultura sólidos e líquidos.

8. Lavar a lâmina com água;
9. Cobrir a lâmina com solução de fucsina por
30 segundos;
10. Escorrer e lavar rapidamente a lâmina em água e deixar secar.

PRINCÍPIO:
Levando-se em consideração a constituição da parede celular, podemos dividir as bactérias em dois grupos.
Bactérias gram positivas, onde a parede celular é formada principalmente por ácidos teicóicos e as bactérias gram negativas, onde a parede celular é formada principalmente por lipídeos.
Esta
classificação baseia-se na coloração de Gram, onde as bactérias gram positivas, por possuírem grande quantidade de ácidos teicóicos, após coloração por solução de cristal violeta e tratamento com lugol formam um complexo corado azul intenso, que não é removido facilmente com álcool. As bactérias gram negativas não retém a coloração após o tratamento com álcool e são reveladas posteriormente com solução de fucsina e apresentam-se de coloração avermelhada. RESULTADOS ESPERADOS:
As bactérias gram positivas coram-se de roxo. As bactérias gram negativas assumem coloração avermelhada. REAGENTES E APRESENTAÇÃO:
Violeta Cristal ------------------------------------ 1 g
Oxalato de amônio ------------------------------ 0,8 g
Álcool etílico 95% ------------------------------- 20 ml
Água deionizada ------------------------------- 100 ml
Apresentação:
Frasco de 50, 500 e 1000 ml
MATERIAIS NECESSÁRIOS NÃO FORNECIDOS:
•
Suporte para coloração
•
Solução de lugol
•
Solução de fucsina

•

Etanol 96O GL

ARMAZENAMENTO E ESTABILIDADE:
O corante deve ser mantido no frasco original, bem vedado, armazenado à temperatura ambiente e ao abrigo da luz.
PRECAUÇÕES:
•
Os cuidados habituais de segurança devem ser tomados na manipulação do produto. Não