Micro Relat rio 1
(Coloração de Gram)
Introdução:
A coloração de Gram é um método de coloração de bactérias desenvolvido pelo médico dinamarquês Hans Christian Joachim Gram (1853 - 1838), em 1884, e que consiste no tratamento sucessivo de um esfregaço bacteriano, fixado pelo calor, com o reagente cristal violeta, lugol, álcool-acetona e fucsina. Essa técnica permite a separação de amostras bacterianas em Gram-positivas e Gram-negativas e a determinação da morfologia e do tamanho das amostras analisadas. A coloração de Gram é um dos mais importantes métodos de coloração utilizados em laboratórios de microbiologia e de análises clínicas, sendo quase sempre o primeiro passo para a caracterização de amostras de bactérias. A técnica tem importância clínica uma vez que muitas das bactérias associadas a infecções são prontamente observadas e caracterizadas como Gram-positivas ou Gram-negativas em esfregaços de pus ou de fluidos orgânicos. Essa informação permite ao clínico monitorar a infecção até que dados de cultura estejam disponíveis. É possível a análise de vários esfregaços por lâmina, o que facilita a comparação de espécimes clínicos. As lâminas podem ser montadas de forma permanente e preservadas como documentação.
Objetivo:
Confeccionar uma lâmina e utilizar a técnica de Gram para visualizar a morfologia das bactérias ao microscópio óptico dos seguintes locais: boca e garganta, em ágar sangue; nariz e pele, em ágar nutriente.
Materiais:
- Lamina;
- Solução salina;
- Alça bacteriológica;
- Bico de Bunsen;
- Colônia de bactérias;
- Cristal Violeta, Lugol, Álcool-acetona, Fucsina;
- Microscópico.
Métodos:
1. Sobre a lâmina de vidro, colocou-se uma gota de solução salina. Com a alça bacteriológica tocar levemente na superfície da colônia e emulsionar o material na gota de solução salina;
2. Passou-se o esfregaço na chama do bico de Bunsen, três vezes, a fim de fixar o material;
3. Posteriormente, cobriu-se o esfregaço seco com cristal violeta e