Larvicidal Activity and Toxicity of the Extract and Fractions of the Bark of Schinopsis brasiliensis Engler

Avaliação de método para concentração e detecção molecular do vírus da Hepatite A em água de ambiente
SANTOS, M.I.S.1; ISMERIM, M.A.G.S2; CÂNDIDO, A.L.1
1 Laboratório de Virologia Comparada, Departamento de Morfologia/CCBS/UFS, E-mail: [e-mail].
2 Departamento de Química/CCET/UFS

O vírus da Hepatite A (HAV) é o agente causador de hepatite infecciosa humana mais frequente, contabilizando a maioria dos casos reportados de hepatite aguda e por isso considerado um problema de saúde pública no Brasil e no mundo. Adquirida principalmente pela rota fecal-oral, a infecção por HAV é disseminada facilmente por ingestão de água ou comida contaminada, tornando-se então uma questão de grande importância que demanda esforços globais e tecnologias modernas para análise e monitoramento das reservas hídricas e seus recursos. O desenvolvimento de métodos baseados no ácido nucléico facilitou a detecção de vírus selvagens que replicam pobremente ou não replicam em culturas de células como o HAV. A concentração é uma etapa crítica na detecção viral, pois o número de partículas virais em águas é geralmente muito baixo, necessitando-se de um grande volume para a concentração destes. Assim, métodos eficientes de concentração viral visando à detecção molecular em amostras ambientais tornam-se relevantes. Pelo exposto, este trabalho propõe uma metodologia rápida e barata de obtenção viral para detecção molecular baseada na precipitação de proteínas. Amostras de 1L de água destilada e de esgoto sem tratamento foram contaminadas artificialmente com a amostra viral HAF-203 e diluídas em série até 10 PFU/mL. As partículas foram precipitadas com mesmo volume de solução saturada de sulfato de amônio por 48 hr a 4º C e submetidas à centrifugação. Alíquotas de cada diluição foram dosadas para proteínas por Bradford (1976). O RNA total foi obtido por tratamento com Proteinase K (25 mg/mL), fenol:clorofórmio:álcool isoamílico (25:24:1), acetato de potássio 5M e