Imunologia - Prática Coombs Direto

Centro Universitário Católica De Santa Catarina
Curso De Biomedicina – Disciplina De Imunologia
Profª Ana Paula Aguiar Prudêncio

Aula Prática 04
Teste De Coombs Direto

Victoria Cunha Farah, Bruna Oliveira, Camila Albano, Caroline Brenny

Junho
2014

OBJETIVO

Realizar teste para detecção de anticorpos que causam a doença hemolítica do recém-nascido ou eritroblastose fetal

MATERIAIS

- Amostra (sangue)
- Solução salina 0,9%
- Centrífuga
- Luvas descartáveis
- Micropipetas
- Ponteiras
- Tubos de ensaio
- Reagentes Soro de Coombs BSA®
- Recipiente para descarte material
- Caneta marcador permanente

PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL

Preparar uma suspensão de 5% das hemácias a serem classificadas em solução fisiológica (50µL da amostra + 950 µL de solução salina) o Em um tubo de ensaio colocar da suspensão de hemácias a 5%. o Adicionar 5mL de solução salina ao tubo contendo a suspensão de hemácias a 5%. o Preparar um segundo tubo com solução salina contendo o mesmo volume do primeiro (5mL + 50µL) a fim de calibrar a centrifuga. o Realizar a lavagem das hemácias 3 vezes
- Centrifugar a 2.000 rpm a 30 segundos
- Descartar o sobrenadante
- Acrescentar mais 5 mL de solução salina.
- Repetir o procedimento o Após a última lavagem, descartar completamente o sobrenadante, adicionar 2 gotas do Soro de Coombs BSA® o Homogeneizar e centrifugar durante 30 segundos a 2.000 rpm. o Ressuspender o botão de hemácias agitando delicadamente o tubo e observar presença ou não de aglutinação. o Anotar os resultados

INTERPRETAÇÃO DOS RESULTADOS:
TESTE DE COOMBS DIRETO
Presença de Aglutinação +
Ausência de Aglutinação -

1. Qual foi o método diagnostico utilizado?
Método de coombs direto (teste de antiglobulina), do qual é usado no diagnóstico de doenças auto-imunes e doença hemolítica do recém-nascido, detectando anticorpos ligados à superfície das hemácias.

2.