Fungos

Metodologia:

Coleta:

Realizada com um frasco de maneira superficial ( entre 30cm e 50 cm da superfície), as amostras dos 3 pontos foram acondicionadas em um isopor com gelo para preservá-las no trajeto entre a reserva e o laboratório. Técnica dos tubos múltiplos:

Fizemos três diluições para cada um dos pontos (10 mL, 100 mL e 1000mL), após realizamos o processo dos tubos múltiplos em cada uma das diluições dos 3 pontos, esse processo é um método quantitativo para determinar o número mais provável dos microrganismos que serão a finalidade de nosso estudo.

Spread Plate

Nesse método adiciona-se 0,1 mL de uma diluição da amostra com pipeta estéril no centro da placa e espalha-se com o auxílio de uma alça de Drigalski ou um bastão estéril, esse procedimento foi efetuado em duplicata para todas as diluições de cada um dos pontos e levados a estufa em duas temperaturas 20°C e 28°C, acompanhamos as placas incubadas por 5 dias para visualizar o crescimento e desenvolvimento das colônias.

Meios utilizados

Agar Sabouraud com cloranfenicol (leveduras e fungos filamentosos)
Agar PDA (batata-dextrose) (fungos filamentosos)

Ao término dessa prática realizamos a caracterização Macroscópica (Cor, Contorno, Relevo e textura), importante para o processo final de identificação dos fungos.
Após o processo de caracterização foram selecionados os fungos que apresentaram melhor crescimento e realizado o processo de isolamento desses microorganismos em placas de petri.

Caracterização Microscópica

Lâminas a fresco:

Em uma lâmina pingar uma gota de água destilada e em seguida colocar, com a ajuda de uma agulha, uma alíquota da amostra esperar secar e utilizar o corante azul de metila, após a secagem levá-lo para identificação microscópica, esse procedimento foi realizado para leveduras e para os filamentosos (nesse caso sem a utilização do corante).
Por fim foi utilizada a técnica de Microcultivo apenas para as amostras de fungos