Extração de dna

Objetivos

Extrair o DNA de diferentes células vegetais;
Comparar os métodos utilizados;
Identificar quimicamente o DNA de células vegetais

Materiais

- Banana - Saco plástico (tipo zip bag) - NaCl (sal de cozinha) - Detergente incolor - Gelo - Água destilada - Álcool etílico gelado 95% - Pipeta Pasteur - Tubo de ensaio - Proveta 100ml - Becker 100ml - Filtro de papel - Palito de madeira - Banho-maria - Termômetro - Funil - Reagente de benedict - Água
Procedimentos para extração do DNA

1. Usamos o saco plástico para amassar cerca de 1/2 banana pequena
2. Em um becker, adicionamos 50ml de água destilada, uma colher de chá de detergente e uma colher de chá de sal de cozinha e mexemos, com cuidado para não gerar espuma;
3. Acrescentamos a banana amassada à mistura do becker;
4. Colocamos o tubo em banho-maria a 60°C por 5 min;
5. Resfriamos a solução colocando-a num recipiente com água e gelo por 3 minutos, mexendo cuidadosamente.
6. Colocamos o papel filtro dentro de um funil e ambos sobre um becker;
7. Depois de misturar bem a solução por alguns minutos passamos o líquido pelo papel filtro;
8. Colocamos cerca de 5 dedos do filtrado dentro de um tubo de ensaio;
9. Adicionamos álcool gelado (cerca de 3 dedos) ao tubo de ensaio devagar, escorrendo lentamente pela parede do tubo;
10. Giramos lentamente o tubo de ensaio e aguardamos cerca de 3 minutos para o DNA começar a precipitar;
11. Usamos um palito de madeira para enrolar as moléculas de DNA precipitado;

Procedimentos para a identificação do DNA

1. Retiramos o DNA com um palito e transferimos para um tubo de ensaio;
2. Adicionamos cerca de 8 gotas de benedict ao tubo de ensaio e aquecemos o mesmo em banho-maria.
3. Observamos e comparamos com o tubo controle.

Atividades

1- Comente sobre a função de cada um dos fatores abaixo relacionados na extração do DNA:

a) Álcool gelado
O álcool desidrata o DNA, de forma que este não mais fica