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Exercícios 2
Fixação de conceito e explorando novos horizontes em biotecnologia

1. Responda V para verdadeiro e F para falso (1.0).

a) O entendimento do óperon lac desde meados dos anos 50 e sua exploração a partir de 1990 foram os grandes impulsionadores da biotecnologia. Atualmente, nas células bacterianas destinadas a expressão de proteínas recombinantes apresenta um sistema de expressão de proteínas considerado forte e controlado, pois o gene da T7 RNA polimerase está sob o controle desse modelo de organização gênica bacteriana.___
b) As enzimas de restrição são componentes naturais bacterianos cujo mecanismo foi relatado por Nathans, Arber e Smith ( Laureados em 1978). A capacidade de cortar o DNA em regiões sequência específicas conferia às bactérias um mecanismo de resistência a infecção por bacterófagos.__
c) As enzimas de restrição – tesouras moleculares- reconhecem pequenas sequências de DNA ao longo de um genoma, em geral entre 4 a 8 pb._
d) Enquanto que as enzimas de restrição realizam a clivagem das ligações fosfodiéster da molécula de DNA, a T4 DNA ligase é responsável pela ligação das fitas de DNA .___
e) Quais dos itens abaixo devem ser evitados quando se trabalha com enzimas de restrição
a. Exceder o tempo de clivagem
b. Atividade estrela (Star activity)
c. Glicerol
d. EDTA
e. Fenol, clorofórmio e outros solventes orgânicos
f. Elevada concentração de sal
f) Como você pode induzir as células em um estado competente em um laboratório?
g) Porque a o vetor tem um gene de resitencia?
h) A inativação das enzimas de restrição é feita por aquecimento, no caso da BamHI essa temperatura é de 20minutos a 80°C. Explique porque a molécula de DNA alvo não é perdida durante o processo.
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i) A enzima