Enzimas 2 FG2012

O significado do KM

Valores de KM para algumas enzimas e seus substratos K M = k2 + k3 k1 Se k2 >> k3

KM =

k2 k1 = Kd(ES)

KM é uma medida da afinidade pelo substrato !

Variantes da mesma enzima com diferentes
KM são isoenzimas

Células possuem variantes da mesma enzima com diferentes KM
Metabolismo do etanol:
CH3CH2OH + NAD+

(cérebro)
Km = 0,1 mM

CH3CHO + NADH + H+

álcool desidrogenase

(fígado)
Km = 10 mM

CH3CHO + NAD+ + H2O

CH3COO- + NADH + H+

aldeído desidrogenase

2 isoformas de aldeído desidrogenase: mitocondrial KM baixo citossólica
KM
alto

1

O significado de Vmax

Valores de kcat para algumas enzimas

V0 = k3 [ES] se [ES] ~ [Et]
V0 ~ Vmax
Vmax = k3 [Et] k3 = Vmax
[Et]
k3 = kcat

Número de moléculas de produto produzidas por uma molécula de enzima em um segundo!

constante catalítica ou número de renovação

Qual parâmetro (Km ou kcat) é mais importante para a eficiência de uma enzima ?

Eficiência catalítica das enzimas

kcat
KM

Limite físico para eficiência enzimática: coeficiente de difusão: 108 - 109 M-1 s-1
Indica quem é o substrato “natural” ou favorito de uma enzima

2

Inibição enzimática

Inibição enzimática irreversível
Inibidor se associa à enzima por ligação covalente

Substâncias que diminuem a atividade de enzimas INIBIDORES
Inibidores podem ser tanto constituintes normais das células como substâncias estranhas.
Importância:
- Entendimento do funcionamento das enzimas
-Terapêutica - drogas são inibidores enzimáticos
Reagentes grupo-específicos:
Organofosforados (pesticidas)
Iodoacetamida (SH)
Certos medicamentos

Irreversível vs. Reversível

Aspirina é um inibidor irreversível das ciclo-oxigenases

Inibição enzimática reversível
Ligação entre E e inibidor é não-covalente !

não-competitiva

competitiva

Inibidores estabelecem um equilíbrio com E e S.

3

Inibição competitiva

E+I
Ki =

Inibição competitiva

EI
[EI]
[E] [I]
Substrato reverte inibição - “desloca”o inibidor

Inibição competitiva

Inibição não-competitiva

com