Cromatografia

MÉTODOS CROMATOGRÁFICOS
Aula 7 – Cromatografia Liquida de Alta Eficiência – CLAE
Profa. Daniele Adão

Cromatografia a líquido clássica

O que é Cromatografia a líquido de alta eficiência - CLAE?
 Emprego de altas pressões, diferente da CL clássica que opera à pressão ambiente.

 A CLAE é uma técnica de ultra-microanálise podendo, dependendo da substância e do detector empregado, quantificar massas de componentes inferiores a 10-18g.  Na cromatografia a líquido as espécies que estão sendo analisadas sofrem influência enorme da FE, e ao mesmo tempo as propriedades destas estão continuamente influenciadas pela FM (fato que não ocorre na CG).

Cromatografia a líquido de alta eficiência
Quais misturas podem ser separadas por CLAE ?

para uma substância qualquer poder ser “arrastada” por um líquido ela deve dissolver-se nesse líquido.

Líquidos e sólidos, iônicos ou covalentes com massa molar de 32 até 4.000.000. Não há limitação de volatilidade ou de estabilidade térmica.

Cromatografia a líquido de alta eficiência
VANTAGENS:  Não necessita que a amostra seja volátil (requisito da CG);  Tempo reduzido de análise;  Alta resolução;  Boa detectabilidade e bons resultados quali e quantitativos. DESVANTAGENS:  Alto custo do equipamento;  Não existe um detector universal com boa detectabilidade e baixo custo.

HPLC, CLAE OU CLAD?
• HIGH PRESSURE (OR PEFORMANCE) LIQUID CHROMATOGRAPHY - HPLC • CROMATOGRAFIA A LÍQUIDO DE ALTA EFICIÊNCIA – CLAE • CROMATOGRAFIA A LÍQUIDO DE ALTO DESEMPENHO – CLAD

DIFERENÇAS ENTRE CG E CLAE
Parâmetros CG CLAE

Fase móvel
Fase estacionária Tamanho da coluna Fase do composto - Injetado - Detectado Temperatura da coluna Identificação dos picos Quantidade mínima detectável

Gás inerte
Líquida ou sólida 1,0 a 100,0m

Líquida
Líquida ou sólida Menor que 30,0cm

Gás ou líquido Gás 100 a 300°C Tempo de retenção

Líquido Líquido Ambiente a 65°C Tempo de retenção

10-12g

10-9g

Detectores mais