Consumo de Glicose por Células de Sacharomyces cerevisae
Saccharomycescerevisiae é um organismo eucariota unicelular que pertence ao Reino dos Fungos. É a levedura utilizada na produção do pão e também da cerveja, além de ser usada para a produção de etanol.
Essa bactéria é utilizada como base para muitas indústrias, como a de panificação e de bebidas. Esse fungo é utilizado como fermento biológico, por liberar dióxido de carbono, por exemplo, na massa de pão, fazendo-a crescer.É um organismo utilizado como modelo no estudo da Bioquímica, Genética e Biologia Celular de eucariotas. Isto porque é de fácil manutenção em laboratório e o conhecimento biológico sobre ela é bem desenvolvido - o seu genoma já foi sequenciado.
A prática realizada no laboratório teve por objetivo demonstrar o consumo de glicose pela Sacharomycescerevisae determinando os níveis de glicose utilizando uma técnica de espectrofotometria. Este procedimento permite avaliar o consumo de glicose, in vitro, através da redução dos níveis de glicose.
2. OBJETIVOS
2.1 OBJETIVO GERAL
O principal objetivo da aula prática foi demonstrar o consumo de glicose pela bactéria Sacharomycescerevisae.
2.2 OBJETIVO ESPECÍFICO Os objetivo específico é determinar o consumo de glicose através de técnica química e espectrofotométrica.
3. MATERIAIS E MÉTODOS
3.1 MATERIAIS - tubos de ensaio - suspensão de células de Saccharomycescerevisiae - solução de glicose a 10% - solução fisiológica tamponada PBS (pH = 7,4) - equipamento para banho-maria - pipetadores - ácido tricloroacético (TCA) a 10% - centrífuga a 3000 rpm - água destilada - espectrofotômetro em 630 nm/ 505 nm
3.2 MÉTODOS
3.2.1 PREPARAÇÃO DA AMOSTRA
Preparou-se três tubos de ensaio, identificados com os números 0, 10 e 20, respectivamente, e procedeu-se conforme o esquema:
1 – adição a cada tubo 0,5 mL da suspensão de células de Saccharomycescerevisiae, 0,2 mL da