Colora o de Ziehl

Coloração de Ziehl-Neelsen

O método de Ziehl-Neelsen é tradicionalmente usado em laboratórios para o diagnóstico de micobacterioses devido à sua simplicidade e rapidez. Quanto ao diagnóstico da paratuberculose, a visualização de bacilos álcool-ácido resistentes (BAAR) em esfregaços corados mediante a técnica de Ziehl-Neelsen a partir de amostras de fezes, mucosa intestinal ou gânglio linfático. A paratuberculose, ou doença de Johne, é uma doença de natureza infecciosa causada por Mycobacterium avium subespécie paratuberculosis. Atinge principalmente os ruminantes, originando uma enterite crônica granulo matosa. Nos casos mais avançados da doença, o diagnóstico não oferece nenhuma dúvida, uma vez que os bacilos são muito abundantes e adotam uma disposição característica em grumos, devido à manutenção da estrutura que têm no interior dos macrófagos. Nos casos em que a quantidade de bacilos é menor, o diagnóstico torna-se mais difícil, na medida em que a amostra que se examina ao microscópio pode não permitir a visualização da micobactéria devido ao fato de ser em pequena quantidade.

São características do gênero:
- Aerobiose estrita.
- Reprodução lenta, mesmo em condições ótimas (seu período de duplicação é de 12 a 18 horas enquanto outras bactérias podem se duplicar em 20 minutos).
- Reações tintoriais próprias que as fazem conhecidas com álcool-ácido-resistentes (B.A.A.R.) evidenciadas pela coloração de Ziehl-Neelsen. Coram-se pela mistura fucsina mais ácido fênico aquecido, que penetra no citoplasma e resistem à descoloração com uma mistura de ácido e álcool.
- Grande resistência à ação dos agentes químicos, o que permite o seu isolamento em material contaminado com outros microrganismos.
- Exigência nutritiva: nos meios comumente usados (Lowenstein-Jensen e Petragnani, à base de ovo), o crescimento se dá após 12 a 15 dias, mas as culturas devem ser mantidas em observação por até 6 a 8 semanas. Antes da semeadura do material, se