Bioquímica
Com base no método de Bradford, conseguimos chegar aos seguintes resultados:
Tubo
1
2
3
4
5
H2O
1ml
0,8ml
0, ml
0,2ml
0ml
Albumina
0ml
0,2ml
0,4ml
0,8ml
1ml
Absorbância:
(valores que nos foi informado para o cálculo)
Concentração
0ml
0,2ml
0,4ml
0,8ml
1ml
Absorbância
0,124
0,180
0,211
0,368
0,451
Conforme podemos observar na curva padrão, a correlação entre absorbância e concentração de albumina se mostrou linear.
Com á analise de absorbância que obtivemos de nossa amostra “X” e “Y” e traçando um plano em direção á reta chegamos aos seguintes resultados:
Solução
Y
X
Absorbância
0,414
0,418
Concentração (albumina)
0,91ml
0,94ml
No entanto este valor informado nos ajudou muito a entender todo o processo, porem o nosso experimento foi errôneo devido á pera estar danificada, com um liquido em seu interior assim alterando diretamente na proporção absorbância x concentração.
Princípios químicos :
Bradford
O método de Bradford11 é uma técnica para a determinação de proteínas totais que utiliza o corante de “Coomassie brilliant blue” BG-250.
Este método é baseado na interação entre o corante BG-250 e macromoléculas de proteínas que contém aminoácidos de cadeias laterais básicas ou aromáticas. No pH de reação, a interação entre a proteína de alto peso molecular e o corante BG-250 provoca o deslocamento do equilíbrio do corante para a forma aniônica, que absorve fortemente em 595 nm.
Aplicações
O método de Bradford, é mais rápido e sensível que o de Lowry e cols e tem sido utilizado para a determinação de proteínas totais em diversos meios: plasma ou soro sangüíneo,líqüor, saliva humana, produtos alimentícios,leite humano, tecidos de plantas, suspensões de células, avidina e estreptavidina, urina e detergentes.
Biureto
Já no método de Biureto, que é constituído de uma mistura de cobre e hidróxido de sódio com um complexante que estabiliza o cobre em solução, sendo o tartarato