Bioquímica

No dia 10/04/14 fomos ao laboratório de bioquímica para trabalhar com proteínas, que são as moléculas orgânicas mais abundantes e importantes nas células e perfazem 50% ou mais de seu peso seco. São encontradas em todas as partes de todas as células, uma vez que são fundamentais sob todos os aspectos da estrutura e função celulares. Todas as proteínas, independentemente de sua função ou espécie de origem, são construídas a partir de um conjunto básico de vinte aminoácidos, arranjados em várias sequências específicas. Um exemplo da utilização de proteínas é na técnica de ELISA para a pesquisa de anticorpos no diagnóstico do vírus do HPV. Nesse método, o anticorpo de um antígeno particular é, inicialmente, adsorvido no well. Depois, o antígeno (soro, urina ou outra solução contendo o antígeno) é adicionado e se liga ao anticorpo. Finalmente, um segundo e diferente anticorpo ligado à enzima é adicionado. Nesse caso, a intensidade da reação é proporcional à quantidade de antígeno presente. Logo, permite mensurar até pequenas quantidades de antígeno. Quanto ao método de revelação, pode ser direto ou indireto. No primeiro, a enzima reveladora encontra-se ligada diretamente ao segundo anticorpo, enquanto no indireto, a enzima apresenta-se ligada a um anti-anticorpo. Realizamos os seguintes processos: reação de precipitação sem desnaturação, reações de precipitação com desnaturação e determinação do ponto isoelétrico da caseína.
No primeiro procedimento misturamos, em um béquer, 5ml de solução de ovoalbumina com sulfato de amônio ((NH4)2SO4) em pó, até obter um precipitado cremoso. Esse precipitado foi filtrado em papel filtro para um tubo de ensaio. Depois de filtrado o conteúdo, obtivemos o tubo de ensaio F com o filtrado, o tubo de ensaio P com o precipitado e o tubo de ensaio C com 2ml de água destilada, que era o nosso controle. Em cada tubo adicionamos 0,5ml de hidróxido de sódio (NaOH) 12M e depois 0,5ml de sulfato de cobre II (CUSO4) 0,5% e agitamos.
Foram