Bact Rias

1. OBJETIVO
Este Procedimento Operacional Padrão (POP) tem como objetivo estabelecer a metodologia para Contagem Total de Bactérias pelo em amostras de água.
2. CAMPO DE APLICAÇÃO
Aplica-se à análise microbiológica no setor Microbiologia do Laboratório CQLAB- Consultoria e Controle de Qualidade.
3. FUNDAMENTOS
A contagem em placa de bactérias heterotróficas (HCP), normalmente conhecida como contagem padrão em placas, é um procedimento para estimar o número de bactérias heterotróficas viáveis em águas, particularmente como uma ferramenta para acompanhar variações nas condições de processo, no caso de águas minerais, ou a eficiência das diversas etapas de tratamento, no caso de águas tratadas. Permite ainda verificar as condições higiênicas em diferentes pontos da rede de distribuição.
A quantificação de bactérias heterotróficas é feita pelo método de contagem padrão em placas, determinando o número de unidades formadoras de colônias (UFC). É realizado através do método de plaqueamento em profundidade (pour plate) ou de superfície (spread plate). Os meios de cultivo recomendados são: Ágar Padrão para Contagem (PCA), Ágar R2A e Ágar NWRI (HPCA).

4. SIGLAS
AP - Água peptonada 0,1%
PCA – Plate Count Agar
PBM – Tampão Fosfato com cloreto de magnésio
5. MATERIAIS E EQUIPAMENTOS UTILIZADOS
5.1. Equipamentos
Contador de colônias
Agitador de tubo de ensaio tipo “Vortex”
Balança semi-analítica
Capela de fluxo laminar tipo II
Banho-maria a 45±1ºC (para conservação de temperatura do ágar)
Estufa incubadora regulada a 35±1ºC
Pipetador automático
5.2. Meios de cultura e Soluções
Água Peptonada 0,1% (AP)
Ágar Padrão para Contagem (PCA)
Tampão fosfato com cloreto de magnésio (TFM)
Solução de tiossulfato de sódio (Na2S2O3) a 3%
Solução de tiossulfato de sódio (Na2S2O3) a 10%
Solução de EDTA a 15%

5.3. Materiais
Sacos estéreis com capacidade de 100 mL e 500 mL
Caneta vidrográfica;
Pipetas graduadas de 1 mL e 2 mL ou micropipetas
Placas de Petri estéreis
Tubos de ensaio com