Aula Pr tica 05 Tipagem Sangu nea

Tipagem Sanguínea – Sistema ABO e Rh

Introdução
Este teste classifica o sangue de acordo com a presença dos antígenos principais A, B e Rh na superfície das hemácias e de acordo com os anticorpos séricos anti-A, anti-B e anti-Rh. A tipagem sangüínea ABO e Rh, usando o método direto, é necessária antes de uma transfusão, para evitar uma reação letal. Na tipagem direta, as hemácias do paciente são misturadas ao soro anti-A, com o soro anti-B e com o soro anti-Rh; a presença ou ausência de aglutinação determina o tipo sangüíneo.

Objetivos
Estabelecer a tipagem sangüínea de acordo com o sistema ABO e Rh em Tubo e em Lâminas, usando método direto.

Materiais e Equipamentos
Para execução deste procedimento são necessários:
Centrífuga
Aglutinoscópio
Lâminas
Seringas descartáveis
Heparina
Algodão
Álcool
Lancetas descartáveis
Pipetas automáticas
Ponteiras
Soro anti-A, soro anti-B e soro anti-D
Tubos de ensaio e tubos eppendorf (2mL)
Solução fisiológica.

Os reativos devem ser armazenados em geladeira entre 4o e 6o C.

Procedimentos
Após a coleta sanguínea realizar os seguintes procedimentos:

A) Tipagem em lâminas
1. Limpe bem a Lâmina;
2. Gotejar três gotas de sangue na lâmina;
3. Acrescentar uma gota do soro anti-A na primeira gota, uma gota de soro anti-B na terceira gota e uma gota de soro anti-D na segunda gota de sangue;
4. Misturar bem, cuidado para não contaminar as gotas de sangue;
5. Fazer a leitura no aglutinoscópio.

B) Tipagem em tubo de ensaio
1. Preparar uma suspensão de hemácias colocando em um tubo eppendorf 100 L de sangue e adicionar 1000 l solução fisiológica;
2. Para cada amostra de sangue marcar três tubos de ensaio com a identificação: A, B e Rh;
3. Colocar em cada tubo duas gotas de anti-soro correspondente, como segue: Tubo A: soro anti – A, Tubo B: soro anti – B e Tubo Rh: soro anti Rh.
4. Colocar em cada tubo duas gotas da suspensão de hemácias;
5. Centrifugar a 2.700 rpm por um minuto;
6. Fazer a leitura, promovendo a agitação da amostra