Extracção de RNA – Método do Isotiocianato de Guanidina Análise de RNA por espectrofotometria e electroforese em gel de agarose

Extracção de RNA – Método do Isotiocianato de Guanidina Análise de RNA por espectrofotometria e electroforese em gel de agarose Ana Campos nº 37293 ; Carolina Collinge nº 38296; Tânia Santos nº 37352 Sinopseooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooo- ooooooooooooo O método single step tornou-se muito utilizado para o isolamento e purificação de RNA intacto a partir de amostras biológicas de diferentes fontes. Esta técnica baseia-se em separar RNA do DNA e das proteínas após a adição de TRIzol, seguido de centrifugação. Deste modo, o RNA permanece na fase aquosa, é precipitado com isopropanol e tratado com DEPC. Recorrendo a métodos electroforéticos, foi avaliada a integridade, quantidade e pureza do RNA extraído, tendo-se observado três bandas de rRNA (5S, 18S e 28S) e um smear (mRNA). Por outro lado, recorrendo a métodos espectrofotométricos, extraiu-se teoricamente 1702,4 µg/mL de RNA. Através das razões A260/A280 = 1,44 e A260/A230 = 0,33, conclui-se que a solução contendo RNA estava contaminada com proteínas e álcoois (isotiocianato de guanidina, contido no TRIzol e/ou isopropanol), respectivamente. Introduçãoooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooo- ooooooo Para efectuar estudos baseados em RNA é essencial obter esta molécula intacta, purificada e em elevada quantidade partindo de pequenas quantidades de tecido e células [1]. O método mais utilizado para extrair RNA foi desenvolvido por Chomczynski e…

reacção em cadeia de polimerase, ou PCR, é uma técnica de grande versatilidade que permite obter múltiplas cópias de um segmento de DNA. O PCR também é usado para introduzir locais de restrição e mutações pontuais ou para identificar um fragmento particular de DNA numa biblioteca de cDNA. Electroforese em gel[editar | editar código-fonte] Ver artigo principal: electroforese em gel A electroforese em gel é uma das principais ferramentas de trabalho em Biologia Molecular. Em geral,…

MÓDULO I Electroforese Electroforese: uma técnica electrizante Laboratório Virtual de Biotecnologia Introdução moléculas de DNA que se encontrem A electroforese é uma das técnicas em suspensão numa solução básicas da Biologia molecular e é uma electrolítica (isto é, que possua iões das mais utilizadas pelos cientistas no livres) podem ser separadas através seu técnica da aplicação de uma dada voltagem. permite a separação de moléculas de No final do processo, as…

processo de electroforese (em gel de agarose). Esta técnica foi introduzida cientificamente por A.E. Kabat e Arne Tiselius em 1939, com a intenção de separar partículas orgânicas. A electroforese em gel, é uma técnica de separação de moléculas, que envolve a migração de partículas num determinado gel durante a aplicação de uma diferença de potencial. As moléculas são separadas de acordo com o seu tamanho, assim como o seu formato, pois as de menor massa irão migrar mais rapidamente…

Observação de ADN plasmídico num gel de agarose Trabalho realizado por : Mariana Abreu 12º A Ano Lectivo 2012/2013 Disciplina de Biologia Prof. Ana Caldeira Colégio Campo de Flores Índice Introdução…………………………………………………………………………………………………………………………...3 A Engenharia Genética……………………………………………………………………………………………..3 Técnica básica utilizada em tecnologia de DNA – electroforese em gel…………………..3 Aplicações desta…

principal: PCR A reacção em cadeia de polimerase, ou PCR, é uma técnica de grande versatilidade que permite obter múltiplas cópias de um segmento de DNA. O PCR também é usado para introduzir locais de restrição e mutações pontuais ou para identificar um fragmento particular de DNA numa biblioteca de cDNA. Electroforese em gel[editar] Ver artigo principal: electroforese em gel A electroforese em gel é uma das principais ferramentas de trabalho em Biologia Molecular. Em geral, DNA, RNA…

artigo principal: PCR A reacção em cadeia de polimerase, ou PCR, é uma técnica de grande versatilidade que permite obter múltiplas cópias de um segmento de DNA. O PCR também é usado para introduzir locais de restrição e mutações pontuais ou para identificar um fragmento particular de DNA numa biblioteca de cDNA. Electroforese em gel Ver artigo principal: electroforese em gel A electroforese em gel é uma das principais ferramentas de trabalho em Biologia Molecular. Em geral, DNA,…

principal: PCR A reacção em cadeia de polimerase, ou PCR, é uma técnica de grande versatilidade que permite obter múltiplas cópias de um segmento de DNA. O PCR também é usado para introduzir locais de restrição e mutações pontuais ou para identificar um fragmento particular de DNA numa biblioteca de cDNA. Electroforese em gel[editar]Ver artigo principal: electroforese em gel A electroforese em gel é uma das principais ferramentas de trabalho em Biologia Molecular. Em geral, DNA, RNA…

Biologia molecular A Biologia Molecular é o estudo da Biologia em nível molecular, com especial foco no estudo da estrutura e função do material genético e seus produtos de expressão, as proteínas. Mais concretamente, a Biologia Molecular investiga as interacções entre os diversos sistemas celulares, incluindo a relação entre DNA, RNA e síntese proteica. É um campo de estudo alargado, que abrange outras áreas da Biologia e da Química, em especial Genética e Bioquímica. Índice 1…

ELECTROFORESE – DESCRIÇÃO TEÓRICA, EVOLUÇÃO DO MÉTODO E APLICAÇÕES Introdução Diariamente um bioquímico depara-se com tarefas para a realização das quais é necessária a separação de partículas, nomeadamente moléculas de elevado peso molecular, como proteínas, enzimas, polissacarídeos, vírus e ácidos nucleicos (DNA e RNA). Para isso, ao longo dos tempos foram-se descobrindo e desenvolvendo vários métodos, entre os quais a electroforese. Esta técnica baseia-se na separação de…