Digestão de amostras massa

Procedimento Digestão de amostras Procedimento Amostras - A amostra e os marcadores em duplicata foram corridos em gel de poliacrilamida 1D 12,5%. As amostras e o marcador estavam em ambos os extremos do gel; - O gel foi divido em dois, um dos lados foi submetido a coloração com Comassie (gel 1) e descorado com solução metanol 10% e acido acético 5%. Neste gel foi identificado a região onde se encontrava a proteína; - O gel não corado (gel 2) foi mantido em metanol 50% até a identificação das bandas; - Após a visualização das bandas no gel 1, a região análoga no gel 2 foi cortada em pequenos fragmentos; - Os fragmentos foram lavados 3x com tampão bicarbonato de amônio50mM pH 8,0 sendo esta solução desprezada após; - Foi adicionado nos fragmentos solução (1:1) de acetonitrila e bicarbonato de amônio 50mM pH 8,0 e esta removida no speed-vac; - Os géis foram cobertos com tampão bicarbonato de amônio 50mM pH 8,0 contendo tripsina 12,5ng/ul e 2 mM de cloreto de cálcio overnight 37°C; - Os géis foram centrifugados 16000 g e o sobrenadante recolhido em novo tubo; - Os géis foram ainda lavados com solução (1:1) de acetonitrila e bicarbonato de amônio 50mM pH 8,0; - Os géis foram centrifugados 16000 g e o sobrenadante recolhido junto com o sobrenadante da digestão; - O tubo contendo os sobrenadantes foi seco no speed-vac; - A alíquota foi resuspendida em 20µl de H2O miliQ; Protocolo Gel de Agarose - Posicionar os suportes dentro do gel; - Em…

UNIVERSIDADE DO EXTREMO SUL CATARINENSE - UNESC CURSO DE FARMÁCIA DERLI BARCELOS GUIMARÃES HELEN TAMIRES GOMES SANTOS EXTRAÇÃO DE FLAVONÓIDES CRICIÚMA, 2014. DERLI BARCELOS GUIMARÃES HELEN TAMIRES GOMES SANTOS EXTRAÇÃO DE FLAVONÓIDES Trabalho apresentado para cumprimento parcial da disciplina de Farmacognosia no curso de Farmácia. Da Universidade do…

Exercícios - Romantismo (Respostas ao final) Questão 01) Leia o seguinte fragmento de I-Juca Pirama, de Gonçalves Dias. II Em fundos vasos d'alvacenta argila Ferve o cauim; Enchem-se as copas, o prazer começa, Reina o festim. O prisioneiro, cuja morte anseiam, Sentado está, O prisioneiro, que outro sol no ocaso Jamais verá! A dura corda, que lhe enlaça o colo, Mostra-lhe o fim Da vida escura, que será…

Exercícios de revisão - Romantismo brasileiro Questão 01) Leia o seguinte fragmento de I-Juca Pirama, de Gonçalves Dias. II Em fundos vasos d'alvacenta argila Ferve o cauim; Enchem-se as copas, o prazer começa, Reina o festim. O prisioneiro, cuja morte anseiam, Sentado está, O prisioneiro, que outro sol no ocaso Jamais verá! A dura corda, que lhe enlaça o colo, Mostra-lhe o fim Da vida escura, que será mais breve Do que o festim! Contudo os olhos d'ignóbil…

molécula? C = 24,1% G = 18,5% T = 24,6% A = 32,8% 5) Explique por que ácidos nucleicos são desnaturados quando submetidos a alta temperatura ou pHs extremos? Uma molécula de DNA desnaturada por aquecimento pode ser renaturada? Como? 6) Quais das seguintes afirmações sobre o DNA isolado de um cromossomo eucariótico são corretas? - É resistente à quebra durante a extração por seu grande tamanho. - É linear e não ramificado - É uma molécula única - Pode ter tamanho superior a 100…

soluto e esgota-se no processo de alteração de novos minerais. No horizonte C a intensidade da alteração é bastante reduzida e, em processo gradativo passa para rocha, em estágios diversos de alteração, até rocha sã. A alteração, com a participação da matéria orgânica, é alvo dos estudos da Pedologia (ciência dos solos), como uma variação dos processos clássicos de intemperismo, e constitui a base para a classificação dos perfis de solos, voltada para as atividades agrícolas.…

A PAISAGEM COMO CONDICIONADORA DE BORDAS DE FRAGMENTOS FLORESTAIS Bethania Cristiane Herrmann*, Efraim Rodrigues**, André de Lima*** * Enga. Agrônoma, M.Sc., Curso de Pós-Graduação em Agronomia, UEL - bethaniach@yahoo.com.br ** Eng. Agrônomo, Depto. de Agronomia, UEL - efraim@uel.br *** Geógrafo - andlima_pr@yahoo.com.br Recebido para publicação: 14/05/2003 - Aceito para publicação: 20/04/2005 Resumo A paisagem como condicionadora de bordas de fragmentos florestais. Fragmentos…

CENTRO UNIVERSITÁRIO FACVEST CURSO DE CIÊNCIA DA COMPUTAÇÂO. ACADÊMICOS: OpenGL “cidade “ 2012 OpenGL OpenGL, assim como DirectX, é uma API (Application Programming Interface), termo usado para classificar uma biblioteca de funções específicas disponibilizadas para a criação e desenvolvimento de aplicativos em determinadas…

TCP/IP e considerando uma rede classe C, assinale a alternativa que apresenta a máscara para dividi-la em 8 (oito) subredes. a) 255.255.255.128 
 b) 255.255.255.192 
 c) 255.255.255.224 
 d) 255.255.255.240 
 e) 255.255.255.248 2) Uma sub-rede de microcomputadores foi configurada por meio do esquema de máscara de tamanho fixo com o IP 203.197.168.160/27, de acordo com a notação CIDR. A faixa total de endereços atribuída a essa sub-rede é a) de 203.197.168.160 a 203.197.168.175.…

assim um meio isotónico. Quando isto acontece, ocorre uma difusão simples, que é um transporte passivo e vai a favor do gradiente de concentração, neste transporte não há gasto de energia, não há “ajuda” de enzimas. No entanto, a água tende a passar através da membrana plasmática do meio hipotónico para o hipertónico, de modo a diluir o meio mais concentrado, obtendo assim dois meios isotónicos. A este movimento exclusivo da água, chamamos osmose. Na consequência dos movimentos…