trabalho
DNA
Dupla-hélice composta de nucleotídeos ligados entre si e cujas bases nitrogenadas de uma hélice fazem pontes de hidrogênio com bases nitrogenadas de outra hélice, numa direção anti-paralela. Replicação do DNA
Processo que precede a divisão celular e através do qual são geradas cópias idênticas das moléculas de DNA presentes na célula-mãe, a seguir herdadas pelas duas células-filhas
Duplicação dos cromossomos Separação dos cromossomos Divisão celular
Cada vez que uma célula divide a informação genética precisa ser transmitida às células filhas
formação de gametas para transmissão da informação para a próxima geração Ciclo Celular
Antes de iniciar a condensação dos cromossomos o DNA necessita ser duplicado : é a fase S
Experimento de Meselson & Stahl, 1958
A pergunta
Experimento de Meselson & Stahl, 1958
Molécula parental
A resposta
Primeira geração de moléculas “filhas”
Segunda geração de moléculas “filhas”
Cultivo de bactérias em meio contendo
15NH Cl,
4
Isótopo pesado de N
Transferência para meio contendo 14NH4Cl
Extração e purificação do DNA seguida de centrifugação em gradiente de CsCl
Replicação do DNA - características
Fita 1 parental
Fita 2 parental
Fita 1
Fita 2 Fita 1 Fita 2 parental “filha” “filha” parental
• Síntese de DNA é semi-conservativa Replicação do cromossomo bacteriano
Cultivo de bactérias em meio contendo
Trítio (3H), isótopo radioativo de H
Isolamento do DNA, espalhamento em emulsão fotográfica
Experimento de J. Cairns, 1963
Observação em microscópio eletrônico
Replicação do DNA - características
•Começa numa origem de replicação (Ori) e é bidirecional O genoma bacteriano circular constitui um único replicon
• A velocidade da forquilha de replicação bacteriana é 50.000 pb/min
• Um única origem de replicação em E.coli
(OriC, 245 pb)
Forquilha de replicação
Região do DNA