trabalho
Embora seja possível o estudo microscópico de células vivas, existem vantagens em obter preparado permanente (lâmina), onde as células ficam coradas e preservadas.
As células são fixadas e coradas, o que permite melhor identificação de seus componentes.
Fixação:
Primeira etapa para obtenção de um preparado permanente, e tem as seguintes finalidades: Evitar a autólise (destruição da célula por suas próprias enzimas).
Impedir a atividade e a proliferação de bactérias. Endurecer as células para que resistam aos processos seguintes.
Aumentar a afinidade das estruturas celulares pelos corantes usados na microscopia óptica.
Processo de fixação: as células são fixadas com formol e aldeído glutárico (glutaraldeído) que fixam as células por se combinarem com os grupamentos amínicos das proteínas.
Inclusão:
Na sua maioria, as células fazem parte de tecidos que precisam ser cortados em fatias finas para exame no microscópio –
Micrótomo.
Na obtenção de secções delgadas com micrótomo os fragmentos de tecidos e órgãos, após a fixação devem ser infiltrados.
Substâncias utilizadas: parafina e resinas de plástico. Parafina é a mais utilizada para microscopia de luz.
Coloração:
Quase todas as organelas são transparentes e incolores, devido a esse fato foram criados numerosos processos de coloração.
Corantes básicos: O azul de toluidina e o azul de metileno.
A hematoxilina é um corante muito usado e comporta-se como corante básico.
Corantes ácidos: eosina, orange G e fucsina ácida, coram principalmente os componentes básicos das proteínas citoplasmáticas.
Microscópio
óptico ou microscópio de luz:
Compõe-se de uma parte mecânica que serve de suporte e uma parte óptica, constituída por três sistemas de lentes: o condensador, a objetiva e a ocular.
Condensador: tem a função