Tecnicas de preparaçao e coloração de laminas

Técnicas de preparação e estudo de lâminas citológicas
• Métodos de ensino em Biologia Celular e dos Tecidos: estudo das estruturas e processos celulares;
• Microscopias de luz (ML) e eletrônica (ME) – permitem o reconhecimento da célula como um componente dinâmico e participante do metabolismo corporal;
• Ferramentas utilizadas:
• lâminas com colorações histológicas e histoquímicas ML;
• Telas de cobre contrastadas por metais pesados - ME
(de transmissão, de varredura, etc.)

Técnicas de preparação e estudo de lâminas citológicas
Microscópio de
Transmissão

Luz

e

Microscópio

Eletrônico

de

Unidades de medida usadas:

O aumento total do objeto observado é calculado multiplicando-se os valores do aumento da objetiva e da ocular.
Portanto:

 Preparo de lâminas ----- líquidos de montagem;
 Geralmente contêm elementos ou substâncias que conferem as propriedades de:
- Colorir esporos e outras estruturas do patógeno e/ou células

e estruturas do tecido do hospedeiro = melhor clareza na visualização ao microscópio.
- Fixar a peça ou estrutura a ser observada.
- Impedir o dessecamento da preparação e preservar integridade estrutural, por tempo mais ou menos longo.

Preparação Tecidual
1. Coleta do tecido do animal

2. Corte do tecido em pedaços

3. Fixação

4. Desidratação

7. Montagem
a. em lâminas de vidro para MO.
b. em grades metálicas para MET.

6. Obtenção de cortes
a. com navalha metálica para MO.
b. com lâmina de vidro ou de www.bioaula.com.br diamante para MET.

5. Inclusão
a. em parafina para
Microscopia Óptica (MO).
b. em resinas para
Microscopia Eletrônica de
Transmissão (MET).

Técnicas de Preparação de Lâminas
Preparação do material que se deseja observar à microscopia = etapas de confecção:
1º - Coleta do Material
-Partes dos órgãos ou tecidos são retiradas – bisturi, pinça ou lâmina de barbear – extremamente finos (máx. 4 mm)
2º - Fixação
• objetivo: insolubilizar as